姜黄素对鱼藤酮诱导的帕金森病大鼠模型 的保护作用-神经病学专业论文.docxVIP

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万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者:  日期: 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者: 日期: 年 月 日 摘要 摘要 姜黄素对鱼藤酮诱导的帕金森病大鼠模型的 保护作用 研究生 程宝仓 导 师 白宏英 郑州大学第二临床医院 神经内科 河南 郑州 450014 摘要 背景与目的 帕金森病(parkinson disease,PD)是一种神经系统变性疾病, 以黑质多巴胺 (Dopamine,DA)能神经元进行性变性死亡为主要病理特征。到目前为止,PD 的发病机制尚未完全明了,小胶质细胞介导的氧化应激损伤在 PD 的发病过程中 起到了重要的作用。小胶质细胞是氧自由基的一个重要来源,还原型烟酰胺腺 嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶 是小胶质细胞的一种重要的调质,是小胶质细胞源性活性氧类物质(reactme oxygen species ,ROS)的原始来源和小胶质细胞内促发炎症信息的一个机制。 p47phox 是 NADPH 氧化酶的关键亚基,p47phox 在小胶质细胞源性 ROS 的形成 中发挥着重要作用。 Sirtuins 家族是一组依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)的去乙酰化酶,在哺乳类中表达 SIRT1 到 SIRT7 七种亚 型,沉默信息调节因子 3(silent information responsor type3,SIRT3)是唯一与 人类老化相关的 Sirtuins 家族成员,是一个定位于线粒体基质内的蛋白,与线粒 体的代谢密切相关。过度表达 SIRT3 已经被证实可以提高细胞的呼吸作用和降 低 ROS 的产出。 姜黄素是从姜黄根茎中提取的一种酚性色素, 是姜黄的重要活性成分,具 有抗氧化、抗炎、清除自由基等广泛的药理作用,还能够调节和抑制小胶质细 胞的表达和迁移。研究显示,姜黄素能够通过促进转录因子 Nrf2(Nuclear factor I erythroid 2-related factor)的表达减少细胞内活性氧类物质的产生,从而延缓细胞 的衰老或凋亡。SIRT3 在对抗氧化应激中起重要作用,但是姜黄素能否通过 SIRT3 抑制 P47phox 表达减少小胶质细胞源性 ROS 从而参与 PD 的神经保护目 前仍缺乏相关研究。 为此,本研究选择姜黄素治疗鱼藤酮诱导的慢性 PD SD 大鼠模型,观察 SD 大鼠行为学变化,ROS 含量,SIRT3 mRNA、P47phox mRNA 含量及 SIRT3、 P47phox 的表达情况,探讨姜黄素对 PD 大鼠的保护作用及 SIRT3 所介导的具体 机制,为临床治疗提供理论依据。 材料与方法 清洁级雄性 SD 大鼠 40 只,按随机区组法分为溶剂对照组、姜黄素组、鱼 藤酮组、治疗组,每组 10 只。采用颈背部皮下注射鱼藤酮 28 天制备慢性 PD SD 大鼠模型,并进行行为学评价及 mNSS 评分验证,模型制备成功后,再给予姜黄 素灌胃治疗 28 天。 采用悬尾实验观察大鼠行为学变化,Western-blot 法检测大鼠脑黑质区 SIRT3、P47phox 的表达,RT-PCR 检测大鼠脑黑质区 SIRT3 mRNA、P47phox mRNA 含量,流式细胞仪检测大鼠脑黑质 ROS 含量。 结果 1. 悬尾实验:4 组大鼠挣扎次数比较,差异有统计学意义(P<0.05)。鱼藤 酮组大鼠挣扎次数少于溶剂对照组、姜黄素组,差异有统计学意义(P<0.05); 治疗组大鼠挣扎次数少于溶剂对照组、姜黄素组,多于鱼藤酮组,差异有统计 学意义(P<0.05);溶剂对照组与姜黄素组大鼠挣扎次数比较,差异无统计学意 义(P>0.05)。 2. Western-blot 检测 SIR

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