胶原基仿生骨基质和纤维蛋白止血敷料的免疫安全性研究-生物物理学专业论文.docxVIP

11111111111111111111111111111111111111111111111111 Y1801155 论文独创性声明 本人郑意声明:所里交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得 的成果。尽我所知，除了文中特别加以标性和致谢的地方外，学位论文中不包含其 他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它 教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何 贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 向名:或wν  νν 年 j 月沪日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可 以用不问方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 研她签名: Ov;V 导师签名:智乞今  如 l 年 4 月户H (ο 年 6 月 日 摘要 免疫系统是人体内茧耍的防御性系统，免疫系统的任何结构改变和功能失调， 将使机体免疫抗病能力降低，引起各种感染性疾病、自身免疫性疾病或肿瘤。近年 来，生物药品和生物材料新产品层出不穷，而由于新产品舔加成分不当而对人体健 康产生危害的事例也日渐增多，人们越来越关注生物药品和生物材料的使用安全性。 而对其使用安全性评价的一个重要方面即是对生物材料免疫安全性的评价。 本研究施取了两种胶原蛋白类植入性生物材和←一胶原摹仿生骨基质和纤维蛋 白止血敷料，根据相关潜在免疫毒性效应的免疲反应的类型，针对炎症、免疫抑制 和免疫剌激 3 种免疫效应进行研究，设计了大鼠体内埋植实验，研究这两种生物材 料是否会对大鼠免疫系统造成影响。主要研究内容及结果如下: 1.选取 Wistar 大鼠作为实验动物，将胶原基仿生骨基质和控基磷灰石进行大鼠股骨 侧埋楠，将纤维蛋白止血敷料、纤维蛋白原和胶原蛋白进行大鼠肝脏埋植，至少暴 露 28d; 选择了适应于实验现 j物埋植部位的最大埋植最，即胶原摹仿生骨基质材料 埋植 lcmxO.lcm x O.3cm，知基磷灰石埋植lcmxO.lcmxO.1cm ，纤维蛋白止血敷料埋 植 lcmx lcm xO.4 cm ，纤维蛋白原埋植lcmx lcm x O.4 cm ，胶版蛋白埋植lcmx lcmxO.4 cmo 同时设免疲抑制组(即腹腔注射 lOmg/mL环磷毗版)作为阳性对照，假手术组作 为阴性对照，将已有的无免疫毒性或低免疫毒性的材料(姬基磷灰石、纤维蛋白原和 胶原蛋白)作为平行对照。 2. 对大鼠进行症状和体征观察、白细胞、淋巴细胞及中性粒细胞绝对值计数、免疲 器官指数分析、免疫器官组织学分析、 NK 细胞杀伤活力检测、 T 淋巴细胞亚群分 析、臣噬细胞分泌功能检测和血清中免疫球蛋白 IgG 和 IgM 的测定，实验结果显示: (1)腹腔注射 10mg旭L 环磷毗肢。Omg/kg 体重)，连续 4 天可成功建成大鼠免疫抑 制模型。免疫抑制组大鼠出现明显的口鼻蒙古膜出血、面部肿大:免疫器官出现明显 病变:免疫抑制组大鼠白细胞、淋巴细胞及中性粒细胞绝对值计数、免疫器官指数、 NK 细胞杀伤活力、 T 淋巴细胞亚群、巨噬细胞分泌 IL-l 、IL-6、丁NF-α 和血清中 免疫球蛋白 IgG 和 IgM 含量均显著低于阴性对照细 (PO.05); (2) 各埋植组(胶原基仿生骨基质、纤维蛋白止血敷料、知基磷灰石、纤维蛋白原和 胶原蛋白埋植)大鼠在术后与阴性对照组相比，进食饮水正常，精神状态良好，伤口 愈合良好:体重增加正常，与阴性对照组相比无显著差异 (PO.05); (3) 各埋植组大鼠白细胞均未见异常减少和增多，白细胞计数与阴性对照组相比无 显著差异(P0.05); 手术后第 2 周开始，各埋植组的淋巴细胞绝对值恢复至正常水 平，与阴性对照组相比无显著差异 (P0.05); (4) 各埋植组大鼠在术后与阴性对照组相比，脾脏指数和肝脏指数均无显著差异 (P 0.05); 。(5) 免疫器官病理学切片分析结果表明，各埋植组大鼠在进行手术后与阴性对照组 相比，埋植部位组织、脾脏、胸腺和腹腔淋巴结均无病变，结构正常: 。 (6) 各埋植组大鼠在术后与阴性对照组相比， NK 细胞杀伤活力无显著性差异 0.05) ，并且与NK 细胞自然死亡率有跟着性差异 (P0.05); (7) 各埋植组大鼠在术后与阴性对照组相比，除第 2 周有微弱上升外， CDγCD4+r 淋巴细胞含量、 CD3+CD旷T 淋巴细胞含量均无大崛变化，整体趋势平稳， CD矿/CD旷 比值