姜黄素和黄连素对胆汁酸诱导的人结肠癌细胞增生的抑制作用研究-消化内科专业论文.docxVIP

天漳医科大学硕上学位论文英文缩略词 天漳医科大学硕上学位论文 英文缩略词 ABBREVIATIoNS CUR Curcumin 姜黄素 BER Berberine 黄连素 CoX一2 Cyclooxygenase一2 环氧合酶-2 DCA Deoxycholic acid 脱氧胆酸 PGE2 Prostaglandin E2 前列腺素E2 NSAIDS Non-．steroidal anti·-inflammatory drugs 非甾体抗炎药 RIA RMio immunoassay 放射免疫技术 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链反应 RT-PCR Reverse transcription-PCR 逆转录PCR CIS Cellular immunochemical staining 免疫细胞化学染色 RNA Ribonucleic acid 核糖核酸 dNTP Deoxyribonucleoside triphosphate 脱氧核糖三磷酸 DEPC Diethylpyrocarbonate 焦碳酸二乙酯 AA Arachidonic acid 花生四烯酸 AP—I Activator protein一1 激动蛋白一l NF．K B Nuclear factor-kappa B 核因子一K B IL．6 IIlterleukin．6 白介素．6 NAT N—acetyltransferase N．乙酰化酶 AoM Azoxymethane 氧化偶氮甲烷 ACF Aberrant crypt foci 隐窝异常增生 PKC Proteia kinase C 蛋白激酶C 天津医科大学硕上学付诒f姜黄素和黄连素对胆汁酸诱导的人结肠癌细胞 天津医科大学硕上学付诒f 姜黄素和黄连素对胆汁酸诱导的人结肠癌细胞 增生的抑制作用研究 中文摘要 背景和目的：胆汁酸特别是次级胆汁酸中的脱氧胆酸(DcA)被认为是 胃肠道的致癌因子而日益受到重视。姜黄素(cuR)和黄连素(BER)是具 有抗炎作用的中药植物提取物，近期研究发现它们还可能具有抗肿瘤活性。 本实验旨在观察这两种药物对脱氧胆酸诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖的抑 制作用，探讨其可能的抑癌作用机制。 方法：在HT-29细胞中加入200 l-t M脱氧胆酸来诱导癌细胞的增殖。分 别加入不同浓度的姜黄素和黄连素，培养6、12、24和48小时。采用氮蓝四 唑盐实验(MTT)法测定这两种药物对细胞生长和增殖的影响；用RT-PCR 法检测不同浓度姜黄素和黄连素对环氧合酶一2(COX．2)mRNA的抑制作用： 用免疫细胞化学染色技术鉴定细胞浆中COX．2的表达：用放射免疫法检测细 胞培养液中前列腺素E2(PGE2)的含量。 结果：200 1．1 M DCA可以促进HT-29细胞的增殖，并诱导COX·2 mRNA 的转录、COX一2蛋白的表达及PGE2的合成。 姜黄素浓度为1 u M时，对HT-29细胞生长的抑制率为8．75％：姜黄素 浓度／0．5 1．t M，作用12小时，对DCA诱导的COX一2 mRNA转录有抑制作用； 姜黄素浓度≥l“M，作用时间在24．48小时，可以抑制DCA诱导的COX-2 蛋白的表达和PGE2的合成； COX-2表达的细胞阳性率与细胞培养液中 PGE2的含量呈正相关：姜黄素的作用呈浓度一时间依赖性。 黄连索浓度为1 u M时，对HT-29细胞生长的抑制率为7．38％；黄连素 浓度≥1 u M，作用时间在6一12小时，对DCA诱导的COX一2 mRNA转录有抑制 作用：黄连素浓度≥1 la M，作用时间在24．48小时，可以抑制DCA诱导的 COX-2蛋白的表达和PGE2的合成： COX一2表达的细胞阳性率与培养液中 天津医科大学硕士学位论文PGE2的含量呈正相关；黄连素的作用呈浓度一时间依赖性。 天津医科大学硕士学位论文 PGE2的含量呈正相关；黄连素的作用呈浓度一时间依赖性。 姜黄素和黄连素比较，两者对HT一29细胞增殖、COX一2表达及PGE2合成 的抑制程度上没有显著差别。但在mRNA水平上，黄连素对COX一2转录的抑制 作用强于姜黄素。 结论：姜黄素和黄连素以一种浓度和时间依赖模式抑制DCA诱导的HT一29 细胞的增殖、COX一2mRNA的转录、COX一2蛋白的表达和PGE2的合成，有希望 成为具有广泛应用前景的抗癌新药。 关键词：姜黄素，黄连素，脱氧胆酸，细胞增殖，环氧合酶一2，前列腺 素E2 天津医科大学颁士学位七夸文Study 天津医科大学颁士学位七夸文 Study on the Inhibitory Effect of Curcumin and Berberine on Deoxycholic Aci