姜黄素及其衍生物C086抑制人白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系-药理学(肿瘤药理)专业论文.docxVIP

下载本文档

4
0
约11.18万字
约 112页
2019-02-20 发布于上海
举报
版权申诉

姜黄素及其衍生物C086抑制人白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系-药理学(肿瘤药理)专业论文.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

PAGE PAGE 10 结果：⑴C086 可抑制 K562、HL-60 和 HL60（Bcr/Abl）细胞增殖，且活性较 Cur 明显增强；⑵C086 可下调 K562、HL-60 和 HL60（Bcr/Abl）细胞中 p-Erk、p-Akt、Pkc、 Raf、C-myc、p-Src 蛋白含量；⑶C086 可下调 K562 和 HL60（Bcr/Abl）细胞中 Bcr/Abl 蛋白含量；⑷C086 可下调 K562、HL-60 和 HL60（Bcr/Abl）细胞中 Bcl-2 蛋白含量，上调 Bax 含量；⑸C086 诱导 K562 细胞凋亡，增强细胞中 Caspase3 和 Caspase9 活性，上调细胞中 Fas、Fasl、Caspase3、Caspase9 以及 p53 蛋白含量；⑹C086 诱导 K562 细胞向成熟红系细胞分化。第二部分姜黄素及其衍生物 C086 对白血病细胞中 Hsp90 分子伴侣功能的影响目的：研究姜黄素及其衍生物 C086 对白血病细胞中 Hsp90 分子伴侣功能的影响。方法：⑴免疫印迹分析检测细胞中 Hsp90、Hsp70、p23 和 p60Hop 蛋白含量的变化； ⑵免疫组化检测细胞中 Hsp70 表达的改变；⑶Realtime PCR 检测药物对细胞中 HSP90 和 HSP70 基因 mRNA 水平的影响； ⑷ 免疫共沉淀检测药物对细胞中 Bcr/Abl/Hsp90/Hsp70/p23/p60Hop 蛋白结合状态的影响；⑸荧光光谱实验研究药物与异源表达的 Hsp90 和 NHsp90 的相互作用；⑹Piper Phosphate Assay Kit 检测药物对细胞中 Hsp90 的 ATPase 活性的影响。结果：⑴Cur 和 C086 可以上调 K562、HL60 和 HL60（Bcr/Abl）细胞中 Hsp70 含量，对细胞中 Hsp90、p23 和 p60HOP 含量无明显影响，作用趋势与 GA 一致；C086 可以下调 Hsp90 含量；⑵C086 在 mRNA 水平上调 K562 细胞中 Hsp70 含量，下调 K562 细胞中 Hsp90 含量；⑶Cur 和 C086 可使 K562、HL60 和 HL60（Bcr/Abl）细胞中与 Hsp90 结合的 Hsp70 增多，与 Hsp90 结合的 p23 减少，与 Hsp90 结合的 p60HOP 不变； ⑷Cur 和 C086 可使 K562 和 HL60（Bcr/Abl）细胞中与 Bcr/Abl 结合的 Hsp70 增多，与 Bcr/Abl 结合的 Hsp90、p23 减少，与 Bcr/Abl 结合的 p60HOP 不变；⑸Cur 和 C086 与异源表达的 Hsp90 和 NHsp90 相互作用；⑹Cur 抑制 Hsp90 的 ATPase 活性。第三部分姜黄素衍生物 C086 对 K562 细胞裸鼠异种移植瘤的作用及相关机制研究目的：我们建立了 K562 细胞裸鼠异种移植瘤模型，将在体外研究的基础上继续研究姜黄素衍生物 C086 在体内是否也产生抗癌作用，并探索其体内作用机制。方法： ⑴皮下注射 K562 细胞，建立 K562 细胞裸鼠异种移植瘤模型；⑵将荷瘤裸鼠随机分为四组，分别是生理盐水阴性对照组、C086 低剂量组（50 mg/kg）、C086 中剂量组（100 mg/kg）和 C086 高剂量组（200 mg/kg），每组 6 只裸鼠；⑶观察成瘤情况，比较肿瘤体积；⑷称量离体瘤块质量、计算抑瘤率；⑸摘除眼球取血检测肝肾功能和血电解质；⑹HE 染色光镜下观察肿瘤组织的形态结构；⑺免疫荧光检测肿瘤组织 Bcr/Abl 蛋白表达；⑻免疫印迹检测肿瘤组织中 Erk1/2, p-Erk, C-myc, Hsp70 和 Hsp90 的蛋白含量。结果：⑴高剂量 C086 可以抑制 K562 细胞裸鼠异种移植瘤的生长，抑瘤率为 44.2%；⑵C086 对裸鼠肝肾功能以及电解质代谢没有造成不利影响；⑶C086 下调 K562 细胞裸鼠异种移植瘤中 Bcr/Abl、Erk1/2、p-Erk、C-myc 和 Hsp90 蛋白含量，上调 Hsp70 蛋白含量。结论：本研究首次证明姜黄素衍生物 C086 抑制人白血病细胞增殖。姜黄素和 C086 抑制肿瘤细胞增殖的机制可能与阻断 Hsp90 的分子伴侣功能有关。C086 也可以抑制 K562 裸鼠异种移植瘤的生长。关键词：姜黄素衍生物、Bcr/Abl、增殖、凋亡、分化、Hsp90、分子伴侣、异种移植瘤 Inhibition of Curcumin and its Derivative C086 on Proliferation