胶质瘤相关新基因的研究-外科学专业论文.docxVIP

EST EST Expressed sequence tag 表达序列标签 PaR Polymerase chain reaction 多聚酶链反应 R孓P衄 Reverse transcription polymerase chain反转录多聚酶链反应 reaction Wode health organization 世界卫生组织 cyclin-dependent kinase 4 周期素依赖激酶4 matrix metalloproteinase 2 基质金属蛋白酶2 topoisomerase(DNA)l 拓扑DNA异构酶1 EWS gene 尤因肉瘤基因 Comlanive chromosome hybridzation 比较染色体组杂交 Transducer l oferbB-2 erbB．2转导蛋白I ～一一硎差言蚴硎眦嘲 epidermal growth factor receptor表皮生长因子受体通路底物8 Tumornecrosis factor 肿瘤坏死因子 pathway substrate 8 EDN Eosinophil-derived neurotoxin． 嗜酸细胞来源的神经毒素 CSlF Cleavage stimulation factor． 剪切束4激因子 EGFR Epkiennal growth factor lep．Ajptl)r 表皮生长因子受体 NESH New molecule containing SH3 domaia NESH蛋白 PDGFR Platelet derived growth factor receptor 血小板源性生长因子受体 APC Anaphase-Promoting Complex 有丝分裂后期促进复合体 RPllC Receptorprotein tyrosine kinase 具有受体功能的酪氨酸蛋白激酶 1GF Transforming growth factor 转化生长因子 erbB2 EryfluDblastic leukemia viral oncogene成红细胞白血病病毒致癌基因同 homol092 源体2 MAPK Mitogen-activated protein kinase 丝裂原激活的磷酸激酶 卧1 Intcrleukin·1 白细胞介素l 胶质瘤相关新基因表达研究胶质瘤相关新基因表达研究 胶质瘤相关新基因表达研究 胶质瘤相关新基因表达研究 中文摘要 第一部分：胶质瘤相关基因的反向多点杂交研究 目标利用反向多点杂交技术检测胶质瘤相关基因谱在胶质瘤组织中的表达情 况，为这些基因在胶质瘤恶性进展中的作用提供依据，并找出具有进一步研究价 值的基因。 方法分别提取正常脑和胶质瘤标本中的总RNA，并反转录为eDNA，随机引物 法标记探针，与点于特殊尼龙膜上的基因片断进行反向杂交。用复日SmartView 图像分析软件进行处理，将各个基因的表达强度和0一actine进行比对，根据比 值作相关基因的半定量分析。 结果与正常脑组织比较，2级胶质瘤中表达上调的基因38条，下调24条；3 级胶质瘤中有45条基因上调，17条基因下调：4级胶质瘤中有32条上调，29 条下调，1条差异不明显。经方差分析，按病理级别分组，差异具有统计学意义 (pO．05)的有Caspasel、CDK4、c13、A20、EWS、Caspase3和EPS8。将恶 性胶质瘤(WHOIII级和WH01V级胶质瘤)基因表达水平与WHOII级胶质瘤相 比较，我们发现CDK4、MMP2、TOPl、c13·和卧D17表达水平存在统计学差 异(D0．05)。 结论反向多点杂交可以同时检测数十个基因的表达，并能对表达量高低进行半 定量分析。我们通过这种方法发现，我们发现两条(A20、eps8)与胶质瘤相关 的新基因。 第二部分t A20、EP鼬、RAI)17在胶质瘸中表达的研究 目的：第～部分中我们已经利用反向多点杂交技术筛选到A20、EPS8、RADl7 等有研究价值的基因。我们利用RT-PCR技术对A20、EPS8、RADl7进行进一 步的研究。一方面在更大的样本范围内明确以上基因的表达改变情况，另一方面 通过对这些基因在不同级别星形胶质细胞瘤标本中表达水平的半定量分析为进 一步的功能研究提供依据。 方法：提取6例正常脑组织和16例中枢神经系统胶质瘤标本的总RNA，并反转 录为eDNA。加入相应的引物后PCR扩增。扩增产物电泳后，按预期产物条带 胶质痛相关新皋凼表达研究与内参照之间的比值对相应基凶的表达水平进行半定量分析。 胶质痛相关新皋凼表达研究 与内参照之间的比值对相应基凶的表达水平进行半定量分析。 结果：A20、EPS8、RADl7mRNA在胶质瘤中均有