结球甘蓝-大白菜1号和4号单体异附加系的获得与鉴定-遗传学专业论文.docxVIP

摘 要 植物单体或双体异附加系是重要的遗传材料，在基因定位、物理图谱构建及染 色体工程育种上具有十分重要的作用。本研究以结球甘蓝—大白菜异源三倍体 （ACC，2n=3x=28）为试材，采用小孢子培养、回交选育、细胞学鉴定和核型分析 等方法，进行了结球甘蓝—大白菜单体异附加系的筛选和鉴定研究，成功地诱导出 了小孢子植株，并从二倍体甘蓝（CC）与异源三倍体（ACC）的回交子代中初步 鉴定出了两个单体异附加系，为进一步获得异代换系、易位系提供了材料和细胞学 基础。研究结果如下： 1. 结球甘蓝—大白菜异源三倍体（ACC）不同株系的小孢子胚产率均较低，表 明染色体组的非整倍性对小孢子胚的分化形成具有明显的影响；不同培养基和不同 的预处理对小孢子胚的诱导频率不同，其中 NLN- 15+2, 4- D 0. 2 mg·L-1+6- BA 0. 1 mg·L-1 + KT 0. 05 mg·L-1 组合的培养基和 33℃热激 48h 的预处理有利于该异源三 倍体的小孢子胚诱导。 2. 染色体数目鉴定表明，获得的 10 个小孢子植株的染色体数变动在 14~27 条， 其中染色体数为 14、20 和 27 条的各 1 株，17 和 19 条的各 2 株，18 条的有 3 株， 没有得到附加一条或两条染色体的植株。小孢子株系间在植株长势、株高、叶形、 叶色、花色、花形、花的大小、始花期和育性上存在较大差异。 3.异源三倍体（ACC）与二倍体亲本（CC）正、反交试验表明，以 ACC 为母 本的结籽率极低，仅为 0.01%，以 CC 为母本的结籽率较高，为 1.60%，两者相差 160 倍。因此，在创建 C 染色体组附加 A 染色体组不同染色体的单体异附加系时， 应以异源三倍体做父本为宜。 4. 利用根尖细胞有丝分裂观察及核型分析，从回交获得的 81 个植株中初步鉴 定出了 2 个单体异附加系，分别为附加 1 号大白菜染色体的单体异附加系（CC+A1） 和附加 4 号大白菜染色体的单体异附加系（CC+A4）。 5. 对 2 个单体异附加系的植株形态学性状进行了初步观察，结果显示 2 个附加 系均能正常结球，但球形的形态与二倍体结球甘蓝存在明显差异。 关键词：结球甘蓝；大白菜；异源三倍体；小孢子培养；异附加系；核型分析 Establishment and Identification of 1# and 4# Cabbage-Chinese Cabbage Monosomic Alien Addition Lines Author: Zhang Wei-wei Major: Genetics Tutor: Shen Shu-xing (College of Agronomy, Agricultural University of Hebei, Baoding, China 071001) Abstract Monosomics and disomics additional lines of plants are the important materials in gene location, physical mapping and chromosome engineering breeding. In this paper, the allotriploid（ACC，2n=3x=28）from the hybridization between diploid Chinese cabbage (AA, 2n=2x=20) and autotetraploid cabbage (CCCC, 2n=4x=36) as materials, the screening and identification of monosomic additional lines of cabbage genome with particular chromosome from Chinese cabbage were carried out by means of microspores culture, backcross, cytological identification and karyotype analysis. The embryoids and plantlets were successfully produced from the isolated microspores of the allotriploid. Two monosomic addition lines were preliminary obtained from the filial individuals of CC×ACC. The monosomic additi