金属硫蛋白在Nafion-汞膜修饰电极上的电子转移及金属释放过程研究-分析化学专业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 摘要 摘 要 金属硫蛋I兰t(Metallothionein，MT)是一类低分子量，高半胱氨酸含 量，能结合大量重金属离子的蛋白质。MT在自然界广泛存在，人体、 动物、植物以及微生物体内均含有MT，在体内它参与必需金属的平 衡代谢和重金属解毒过程。到目前为止，MT电化学行为的研究几乎 都是在汞电极上进行的，汞电极有滴汞电极、悬汞电极、静汞电极以 及汞膜电极等。然而，由于MT与汞之间强的结合力，MT中的Cd 和Zn离子有可能被汞所取代。此外，汞电极的机械强度差且容易污 染。具有选择性渗透作用的Nation膜的引入，有望克服上述缺陷。 本文采用新型的Nation．汞膜修饰电极(NCMFE)研究了氧化还原诱导 下MT的金属释放机理及电极表面每个MT分子中发生氧化还原的电 活性的Zn—Cysteine络合物的百分数。 由于Nation和带正电荷的MT分子间相匹配的尺寸和选择性渗 透的交换作用，我们首次在Nation．汞膜修饰电极上观察到MT两对 清晰的氧化还原峰，其还原峰电位(Epc)分别为-0．740V和一1．173V。 Epc=-0．740V处还原峰可归因于Cd．MT配合物的还原，而Epc= 一1．173V处还原峰为Zn．MT配合物的还原。该修饰电极比汞膜电极 具有更优良的特性，因为MT分子中的金属元素Zn和Cd并未被Hg 取代，因此，NCMFE为快速、灵敏地探索表面固定MT的氧化还原 特性提供了一条有效途径。 为了进一步探讨修饰电极上每个MT分子中发生氧化还原的电活 性的Zn．Cysteine络合物的百分数，我们采用Nation．汞膜修饰电极对 富含半胱氨酸和锌的金属结合蛋白，即Zn7．MT进行了定量研究。于 一1．062V处观察到Zn7．MT的氧化还原峰。由于NCMFE较高的析氢 过电位，与其它电极相比，能准确地测定出Zn7．MT的氧化还原峰。 采用电化学方法检测出每个MT分子中发生氧化还原的电活性的 Zn．Cysteine络合物的百分数为22％。该结果与原子吸收光谱检测结 果一致，表明Nation．汞膜修饰电极对MT金属释放定量研究的可行 性。 关键词金属硫蛋白，汞膜修饰电极，Nation，伏安法 硕士学位论文 硕士学位论文 ABSTRACT AB STRACT Metallothionein(MT)is a type of metalloproteins characterized by a large number of cysteine residues，low molecular weight and the absence of aromatic or histidine residues．It exerts itS functions in regulating essential metals，detoxifying heavy metals，scavenging free radicals and controlling the intracellular redox potential．Several groups have described the use of dropping mercury electrodes(DMEs)，hanging mercury electrodes，and thin mercury film electrodes to examine the redox properties of MTs．However,there are certain inherent limitations which lcad to an unambiguous determination of the redox potentials of MTS．T0 alleviate these problems．Voltammetric studies of rabbit liver metallothioneins(MTs，containing both Zn and Cd ions)and Zn7·MT were carried out at Nation．coated mercury film electrodes(NCMFEs)． The accumulation of MT molecules into the NCⅣ匝Es enhances the voltammetric signals and the electrostatic interact