小麦籽粒蛋白质双向电泳体系的优化.pdfVIP

江苏农业学报(JiangsuJ.of Agr.Sci. ),2015,31(5):957 ~961 http:/ / 957 叶景秀. 小麦籽粒蛋白质双向电泳体系的优化[J].江苏农业学报,2015,31(5):957-961. doi:10.3969/ j.issn.1000-4440.2015.05.002 小麦籽粒蛋白质双向电泳体系的优化 叶景秀 (青海省农林科学院,青海 西宁 810016) 摘要: 为建立一套适合于小麦籽粒蛋白质双向电泳的技术体系,以青海省农林科学院自育春小麦品种青春 38籽粒为材料,对比了2种在植物组织中常用的蛋白质提取方法,对双向电泳过程中胶条pH值、蛋白质上样量和 分离胶浓度等方面进行了优化。 结果表明:与用酚提取法相比采用TCA/ 丙酮沉淀法提取的蛋白质所得的双向电 泳图谱质量较好,蛋白质经裂解后在17 cm、pH5~8 的IPG胶条、上样量380 μg和分离胶浓度12%的条件下得到 了清晰、蛋白质点丰富的双向电泳图谱。 关键词: 小麦; 籽粒蛋白质; 双向电泳 + 中图分类号: S512.1 2 文献标识码: A 文章编号: 1000-4440(2015)05-0957-05 Optimization of two-dimensional electrophresis system for grain protein in spring wheat YE Jing-xiu (QinghaiAcademy of Agriculture and Forestry Sciences,Xining 810016,China) Abstract: To developasystemfortwo-dimensionalelectrophresis(2-DE)ofgrainproteinextractedfromspringwheat, two protein extractionmethodscommonlyusedforplanttissueswerecompared. ThepHrange,theloadingquantityof sample andthe gel concentrations were optimized in the 2-DE system for the grains from Qingchun 38. The samples prepared by TCA/ acetone precipitationyielded better quality 2-DE map than by phenol extraction method. The condition of 17-cm IPG with pH5-8,380 μg loading quantity of protein and 12% SDSgel gave rich protein spots in the2-DE map. Key words: wheat; grain protein; two-dimensional electrophoresis 小麦籽粒灌浆对产量及品质至关重要。 前人的 目前,随着植物蛋白质组学研究技术的日渐成 工作主要集中在生理生化水平的研究上,例如分析 熟,植物蛋白质数据库的不断更新,蛋白质组学技术 [1-3] [6] [7] [8] [9] [10] 不同因素对灌浆特性的影响 ,淀粉的积累规 在水稻 、小麦 、拟南芥 、大豆 、烟草 等作 [4] [5] 律 ,各种酶的变化规律等 。 然而,籽粒的灌浆 物中的研究报道日益增多。 以植物蛋白质的提取、 是一个复杂的生理生化过程,仅从生理生化水平无