肝素治疗对重度子痫前期孕妇胎盘中白细胞介素10含量的影响观察.docxVIP

肝素治疗对重度子痫前期孕妇胎盘中白细胞介素10含量的 影响观察 穆凤娟赵新然孙敬Z张红霞 (沧州屮西医结合医院东院区妇产科河北沧州061000) 【摘要】口的：观察小剂量肝素对重度子痫前期孕妇胎盘屮口细胞介素10 (IL-10)的阳性细胞数的影响，探讨肝素治疗重度子痫前期的抗炎机制。方法： 重度子痫前期孕妇180例分为治疗组90例和治疗对照组90例，治疗组连续7 d 每口静脉滴注25%硫酸镁60 mL+肝素25 mg；治疗对照组连续7 d每口静脉滴注 25%硫酸镁60mL,另选择同期正常晚期妊娠孕妇90例作为正常对照组。胎盘正 常娩出后，采用免疫组织化学法检测各组孕妇胎盘中IL-10的阳性细胞数。结果： 正常组、治疗组、治疗对照组胎盘屮IL-10阳性细胞数分别为(26.5plusmn;5.2)、 (16.1 plusmn;3?7)、(6.2plusmn;2.3)个mm?2。治疗组、治疗对照组胎盘中 IL?10阳性细胞数与正常组比较明显降低，差异有统计学意义(Plt;0.01)；而治 疗组胎盘屮IL-10阳性细胞数明显高于治疗对照组，差异有统计学意义(Plt;0.01)o 结论:IL-10作为抑炎细胞因子在重度子痫前期的发病屮起一定作用，肝素可通 过抗炎机制减少重度子痫前期孕妇胎盘屮白细胞介素10的消耗。 【关键词】肝素 口细胞介素10重度子痫前期 【屮图分类号】R45 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2014) 03-0013-02 妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy, HDCP)的 重度子痫前期是导致围产期母儿严重并发症和死亡率增高的重要原因。目前肝素 用于治疗重度子痫前期的机制研究均为抗凝机制，其对重度子痫前期孕妇胎盘白 细胞介素10 (IL-10)细胞因子的影响尚无报导。本研究通过观察肝素对重度子 痫前期孕妇治疗后胎盘白细胞介素10 (lnterleukin-10, IL-10)的阳性细胞数的影 响，探讨肝素治疗重度子痫前期的抗炎机制及重度子痫前期的发病机制，为更好 地指导临床治疗提供实验依据。 1资料与方法 1.1-般资料 2009年10月至2013年02月沧州中西医结合医院东院区妇产科住院并确诊 为重度子痫前期孕妇180例，均符合《妇产科学》第6版诊断标准参照⑴，除 外临产、胎膜早破、感染、恶性肿瘤，无糖尿病和原发肾脏疾病、原发高血压及 凝血功能障碍性疾病，未使用对凝血功能有影响的其他药物，近1个月内未使用 抗生素及免疫抑制剂等对炎症因子有影响的药物。分为2组：治疗组(硫酸镁+肝 素)90例，年龄19?36岁，平均年龄(25.6plusmn;2.5岁)，孕周31?36周， 平均孕周(33.3plusmn;1.8)周；治疗对照组(单纯硫酸镁)90例，年龄20? 35岁，平均年龄(25.1plusmn;2.8)岁，孕周32?35周，平均孕周(34.2plusmn;1.4 周)。随机选择同期正常晚期妊娠孕妇90例作为正常组，年龄20?35岁，平均 年龄(25.8plusmn;2.2)岁,孕周 30?37 周,平均孕周(34.4plusmn;2.1)周。 3组年龄、孕周、孕次比较差异无统计学意义(Pgt;0.05),具有可比性。 1.2治疗方法 治疗组静脉滴注5%葡萄糖溶液1 000 mL+25%硫酸镁60 mL+肝素钠25 mg, 每日1次,维持静脉滴注6?8 h；治疗对照组静脉滴注5%葡萄糖溶液1000 mL+25% 硫酸镁60 mL,每日1次，维持静脉滴注6?8 h。2组方案均可视病情加服心痛 定10 mg,每8 hl次。2组均7d为1疗程。 1.3监测指标及标本采集与处理 胎盘正常娩出后，无菌操作取产后胎盘组织,经液氮冷冻后，转移?70°C待用。 冷冻切片厚度为10mu;m,将切好的胎盘组织片放在预先使用多聚赖氨酸处理的 载玻片上,放置于?70°C备用。取各组组织切片，用免疫组织化学的方法对IL-10的 阳性细胞数进行检测。将冷冻组织切片放入冷丙酮中固定，逐次3g?L-lH2O2甲 醇溶液去除内源性过氧化物酶,lg?L-lTritonX-100溶液通透细胞和山羊血清封闭， 在胎盘组织切片上滴加兔抗人IL-10(l:150倍稀释)，放入湿盒中4 °C过夜。洗掉 一抗后分别滴加生物素化山羊抗兔IgG/HRP二抗，室温作用2h后，即用二氨基 联苯胺(DAB)显色，苏木素复染。每一步骤均用磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次，每 次5min。复染后的组织片经酒精脱水，二甲苯脱酒精后，封片镜检。如细胞具 有完整细胞结构，胞浆被染成棕褐色，而胞核可见为蓝色，为阳性细胞；如细胞 具有完整细胞结构，胞核被染成蓝色，胞浆未被染成棕褐色，在胞核的映衬下