酶膜耦合制备高活性ACE抑制玉米肽及结构研究.pdfVIP

2011年4月 中国粮油学报 V01．26，No．4 andOils 第26卷第4期 JournaloftheChineseCereals Association Apr．2011 酶膜耦合制备高活性ACE抑制玉米肽及结构研究 黄文浩 何 慧 董华伟 吕 杰 李江涛 (华中农业大学食品科技学院，武汉430070) 摘 要 为了充分提高酶解效率及获得高活性的ACE抑制玉米肽，采用酶解与膜分离耦合技术连续化 制备高活性ACE抑制玉米肽，考察了该制备过程中产品的质量和稳定性，比较了不同分子质量级分玉米肽的 ACE抑制活性，以及采用HPLC—MS／Ms对几种玉米肽的结构进行了解析。结果显示：在连续制备5h内，所 ku级分 玉米肽其ACE抑制活性最高(IC舶=0．29mg／mL)；解析出了3种玉米肽的结构，其氨基酸序列分别为 中Mw3ku的玉米肽级分的ACE抑制活性最高；解析出的3种玉米肽均具有ACE抑制肽的结构特点。 超滤HPLC—MS／MS 关键词玉米肽血管紧张素转化酶(ACE) 中图分类号：Q514+．3文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2011)04—0024—06 生物活性肽(Bioactivepeptides)是由组成蛋白目前酶法制备活性肽多采用间歇酶解工艺，但存 质的20个天然氨基酸以不同组成和排列方式构成 在多肽产率与反应转化率低、耗酶量大、产品质量不稳 的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总 定等问题。而酶解一膜分离耦合技术集酶促反应、酶 称，能在蛋白质的胃肠消化…和食物的加工过程中 的回收利用和产物的分离纯化等工序于一体，可以实 释放出来，如干酪的熟制旧1和发酵J，生物活性肽 现水解物在线膜分离，同时提高生产效率和稳定产品 (小肽)以完整形式被胃肠吸收后，通过血液循环作 质量。我国在这方面也开展了一些研究工作，如采用 用于不同的靶器官而发挥全身效应MJ。生物活性肽 超滤技术分离大豆肽哺J、将动态膜分离式酶反应器连 一直是功能食品中的研究热点，大量研究证实生物 续操作成功地用于生物酶法降解菊粉生产果糖工艺 活性肽具有易消化吸收、抗疲劳、抗氧化、抗高血压 中一o。本研究利用酶解一膜分离耦合技术制备高活性 和促进肠道益生菌的生长等生物活性。 ACE抑制玉米肽，并对其中3种以前未报道过玉米肽 高血压疾病是目前世界上死亡率最高的疾病， 的一级结构进行了解析，上述研究目前尚未见文献报 因此预防和治疗高血压疾病一直是人们关注的热 道。旨在充分利用植物蛋白资源，采用酶解一膜分离 点。1965年Ferreira首次从巴西蝮蛇(Bathropsjara— 耦合技术制备高活性ACE抑制玉米肽，为今后实现工 raca)蛇毒里分离出了多肽物质，能增强舒缓激肽的业化生产提供依据，并使其附加值大大提高。 舒张血管作用，称为“缓激肽增强肽(bradykinin—po— tentiatingpeptide)”，后来发现肽类也能抑制血管紧 1 材料与方法 张素转化酶(ACE)而具有降压作用；Suh等怕。从玉米 1．1 材料 黄粉中分离出序列为Pro—Ser—Gln—Tyr—Tyr的一 1．I．1主要原料及试剂 种膜结合蛋白肽，Ic50为100 Yano等∞。在 ixmol／L；S 玉米黄粉(含粗蛋白为69．44％)：正大集团武汉 此基础上又分离出30余种玉米短肽，具有较低的Ic如 值。SMiyoshi等。纠报道了