菜籽多糖WPS-1对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响.pdfVIP

2011年8月 中国粮油学报 V01．26．No．8 oftheChinese 第26卷第8期 Journal CerealsandOilsAssociation Aug．2011 菜籽多糖WPS一1对小鼠腹腔 巨噬细胞免疫功能的影响 朱建飞1’2 唐春红1，2 吴谋成3 (重庆工商大学环境与生物工程学院1，重庆400067) (重庆工商大学绿色食品研究所2，重庆400067) (华中农业大学食品科学技术学院3，武汉430070) 摘要采用M，I’I’法检测细胞的活性，菜籽多糖WlX3一l能促进巨噬细胞增殖，并表现出明显的剂量一 效果关系，WPS一1促进巨噬细胞增殖的最佳质量浓度为40 作用时间下40 r唱／mL mRNA表达的 最佳时间为24h。菜籽多糖对巨噬细胞的免疫功能具有调节作用。 关键词 菜籽多糖巨噬细胞免疫作用 中图分类号：俄29 文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2011)08—0041—05 巨噬细胞是机体免疫体系中重要的免疫效应细 胞。激活的巨噬细胞是宿主抵抗肿瘤的重要因素， 在其中，激活的巨噬细胞分泌IL一1、IL一6、IL一12、 DNA聚合酶：加拿大BBI公司；胎牛血清：杭州四季 TNF一仅等细胞因子，这些细胞因子直接参与巨噬细 胞介导的杀伤肿瘤细胞的作用u-3J。激活的巨噬细 胞增加iNOS的表达，iNOS催化产生大量的NO，NO 是介导巨噬细胞杀伤肿瘤的中心分子【4J。近年来， 海生工生物工程技术服务公司；BALB／e雄性小鼠： 大量药理及临床研究表明，多糖类化合物是一种免 疫调节剂，它能激活免疫受体、提高机体的免疫功 中心。 能L5J。激活巨噬细胞是其发挥免疫调节作用的重要 途径之一L6J。通过研究WPS一1对小鼠腹腔巨噬细 24孔细胞培养板：美国Coming公司；0．22 pxn微孔 胞的影响，检测WPS—l对巨噬细胞增殖活性的作滤膜：上海半岛公司净化器材厂；DFC300FX型倒置 用，并采用RT—PCR法检测了对腹腔巨噬细胞分泌 的细胞因子IL一6和TNF—a的影响，同时检测WlX3分光光度计：北京瑞利分析仪器公司；PTC一100型 一l在mRNA水平对iNOS的调节作用。 PCR仪：美国砌公司；JS一300型图像分析系统：上 海培清科技公司；ELX800型全自动酶标分析仪：美 1 材料与方法 国Bio—Tek公司。 1．1材料与仪器 1．2试验方法 。双低”品种华杂4号菜籽冷榨粕：湖北华益油 1．2．1菜籽多糖提取及纯化工艺路线 料科技公司；巯基乙醇、青霉素、链霉素、脂多糖 脱脂菜籽粕，用热水按最佳工艺流程提取【．¨。 得到的水溶性多糖提取液用筛选出的特l号大孔吸 (LPS)、刀豆球蛋白A(ConA)：美国Sigma—Aldrich 附树脂进行初步纯化【8J，以去除溶液中的游离蛋白 基金项目：。十五”国家重大科技专项(2001BA501A20)。。十一 及酚类等色素物质。流出液经真空浓缩，再通过分