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广西农业科学2010。41(3):223—225
Sciences ·223·
GmgxiAgficuhand
黑皮果蔗花叶病病原鉴定
秦碧霞1一,蔡健和1,莫磊兴2一,魏源文4,刘志明1,朱桂宁t,陆秀红1
(1广西农业科学院植物保护研究所;2农业部甘蔗品质监督检验测试中心;3广西甘蔗研究所;4广西作物遗传改良生物技术重
点开放实验室:南宁530∞7)
摘要:在南宁市郊采集到l份表现褪绿条纹、花叶的黑皮果蔗样品(NN—Ba2),经差速离心和PEG-次沉淀法提取
病毒粗汁液,在电镜下观察到略弯曲的线状病毒粒子;DAC—ELISA检测显示NN—Ba2与甘蔗花叶病毒多克隆抗体和单
克隆抗体呈阳性反应;根据SCMV和SrMVCP基因分别设计合成特异引物,利用RT—PCR对NN—Ba2进行分子鉴定,扩
增出大小约900
bp的预期片段,健康对照未扩增到任何片段;NN—Ba2扩增片段经克隆后测序得到719个有效核苷酸,
测序结果在DDBJ上用BLASl.进行同源性分析,结果显示该序列与已报道的SCMV广东、云南、广西等地分离物对应的
SCMV。田间采集的另外lO份表现花叶症状的果蔗样品经ELISA和RT-PCR检测,证明也感染了SCMV。
关键词:黑皮果蔗;果蔗花叶病毒;PCR鉴定
中图分类号:S435.66l 文献标识码:A
Identificationofmosaicdisease in canebadila
pathogenchewing
WEI
Bi-xial一,CAIJian-hel,MO Yuan-wen4,LIU
QIN Lei-xin92’3 Zhi—min91,
ZHU
Gui-nin91,LUXiu-hon91
PlantProtectionResearch of The
530007,China;2
(1 Institute,GuangxiAcademyAgriculturalSciences,Nanning
and Centerofthe of
Qualit)r MinistryAgriculture,Nanning530007,China;3GnaIlgxi
SugarcaneSupervisionTesting
Research 530007,China;4 Genetic and
Sugarcane Institute,Nanning GuangxiCrop ImprovementBiotechnology
530007,China).
Laboratory,Nanning
Abstract:Aofleavesfrom cane chlorotieandmosaic WaS
sample chewingbadih(NN-Ba2)showingstripe symptoms
collectedfrom suburb.Viruswag fromtheinfectedleavesthemethodofdifferent
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