课件：反定型的必要性.ppt

新生儿溶血临床症状 （一）因红细胞破坏增加，网状内皮系统及肝、肾细胞可有含铁血黄素沉着。 ????（二）骨髓及髓外造血组织呈代偿性增生，肝脾肿大，镜检在肝、脾、肺、胰、肾等组织内可见散在髓外造血灶。 ????（三）贫血导致心脏扩大，血浆蛋白低下、全身苍白、水肿、胸腹及心包等组织内可同凶散在髓外造血灶。 ????（四）高胆红素血症可引起全身性黄疸及核黄疸。核黄疸多发生在基底核、海马钩回及苍白球、视丘下核、尾状核、齿状核等处。神经细胞变性，胞浆黄染，核消失。 ????轻症者多无特殊症状，溶血严重者，可出现胎儿水肿、流产、早产甚至死胎。娩出后主要表现为贫血、水肿、肝脾肿大、黄疸及核黄疸。症状的轻重取决于抗体的多少、新生儿成熟度及代偿性造血能力等。 （三）新生儿溶血症处理 ????注意三个关键时间：1、初生1～2天，轻症者注意黄疸出现时间，加重速度和程度。若出生时贫血严重，脐血血红蛋白＜12g％者，应考虑输血；2、2～7天，重点是针对并防止因高胆红素血症可能引起的核黄疸，应严密监视血清间接胆红素升高的程度和速度，勿使超过发生核黄疸的临界浓度(18～20mg％）；3、产后2个月内，注意红细胞再生功能障碍所致的贫血，必要时输血。 ????预防核黄疸有下列三种方法：⑴药物加速胆红素的正常代谢和排泄；⑵光照疗法变更胆红素排泄途径；⑶换血疗法机械性地去除胆红素；致敏红细胞和抗体。 思考题 在没有标准血清的情况下，怎样单用A型（或B型）血液来鉴定未知者的血型？ 单用A型血液来鉴定结果 实验 结果 A型红细胞+未知血清 + ﹣ + ﹣ 抗-B血清+未知血球 + ﹣ ﹣ + 未知血清血型 B型 A型 O型 AB型 单用B型血液来鉴定结果 实验 结果 B型红细胞+未知血清 + ﹣ + ﹣ 抗-A血清+未知血球 + ﹣ ﹣ + 未知血清血型 A型 B型 O型 AB型 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 ABO反定型的必要性 ABO血型鉴定的原理 ABO血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无A抗原或／和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正（血清试验）反（细胞试验）定型准确鉴定ABO血型。 正定型、反定型定义 正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或／和B抗原， 反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或抗B。 操作过程中的注意点 （1）严格查对，标记明确 （2）吸管等不得混用 （3）先加血清再加细胞 （4）要求正反定型结果相符 （5）不要使悬液干涸（玻片法），肉眼观察必要时再用显微镜观察。 （6）反定型不宜用玻片法 （7）试管法离心后应先观察上清液有无溶血，然后再摇动管底红细胞进行观察。 ABO血型反定型用红细胞试剂盒说明 主要组成成分: A1型、B型、O型红细胞 有效期： 两个月 样本要求：被检者血清或血浆 检验方法： 一、试管法 （1）取被检者血清（或血浆）各一滴（50ul）分别加入三支标记好的小试管中 （2）分别各加一滴（50ul)A1、B、O试剂红细胞 （3）摇动试管离心，速度1000rpm1分钟或3400rpm15秒即可 （4）先观察是否溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来 （5）观察凝集状况，并立即记录结果 ABO血型反定型检验方法 二、微量板法 （1）在U型板三个孔内分别加入25~30ul的被检者血清或血浆 （2）在每孔内分别加入与血清等量的A1、B、O试剂红细胞 （3）混匀 （4）离心，转速2000rpm20秒（离心后反应板应产生清晰的细胞扣及透明的上清液） （5）检测溶血情况 （6）用振荡仪振动微量板，振动能使阳性反应出现凝集的细胞扣，而若是阴性反应很快细胞扣消除 （7）记录结果，亦可用酶标读数仪 ABO正反定型结果 正定型 反定型 血型 抗A试剂 抗B试剂 A细胞 B细胞 O细胞 + － － + － A － + + － － B － － + + － O + + － － － AB ABO反定型实验的局限性 本实验必须与正定型一起进行，正反定型不一致需做进一步研究。单独反定型结果不能作为判断血型的依据。 结果判读注意事项 1.如果在反定型试验中，受检者的血清或血浆与O型红细胞试剂产生阳性反应，则需要添加自身对照试验。如果自身对照为阳性，表明是自身冷凝激素导致。 如果自身对照为阴性，则表明被检者血清或血浆中可能存在ABO系统以外的其他系统的抗体干扰定型。 结果判读注意事项 2.本品如出现红细胞颜色变成暗紫色或红细胞发生凝集，出现菌落或溶血严重，则不能使用，尽量避免因