课件：红细胞血型系统课件.ppt

交叉配血(Matchcross Blood) 二，交叉配血的方法 1. 只能检出不配合的完全抗体 盐水介质法 2.可检出不配合的不完全抗体 抗人球蛋白法 蛋白酶法 低离子介质法等 3.改良的交叉配血方法 交叉配血(Matchcross Blood) 聚凝胺（Polybrene)配血法 利用高价阳离子的多聚季氨盐溶解后产生的大量正电荷可中和红细胞表面的负电荷缩小其之间的距离 微柱凝胶配血法（卡式配血法） 利用葡聚糖凝胶具有分子筛效应 几种交叉配血试验的方法学评价 配血方法 优点 缺点 盐水配血试验 简单、快速 检不出不相配IgG型抗体 酶介质试验 简便、经济 准确性、稳定性差 抗球蛋白试验 准确、可靠 复杂、费时、试剂贵 凝聚胺试验 快速、准确 需特殊试剂及器材 微柱凝胶试验 灵敏 成本高 交叉配血(Matchcross Blood) 三，交叉配血不合的原因 （一）主侧不合：Ps+Dc 主要针对Ps 1.不规则抗体 有同种抗体或自身抗体 2.有高频抗体，与谱细胞凝，自身不凝 3.冷凝集 4.A2抗A1 5.Dc的DAT+ 交叉配血(Matchcross Blood) 二）次侧不合：Pc+Ds 1.Pc做DAT：阳性见于自身抗体，输血反应，HDN 2.Ds中有不规则抗体 3.忽略ABO亚型误定血型 4.冷凝集素吸附于Pc 5.异型输血A,B AB, O AB,A,B 四，交叉配血的注意事项 1.时间与速度 2.水温箱的温度 3.水质 4.用新鲜的标本 5.做抗人球实验时最好用血清 6.注意输血史，妊娠史 7.注意溶血的结果 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 ABO血型全自动微板法检测技术 原理 待测微板进入自动扫描暗室中，扫描U型孔底中线上40个点的透光度。凝集孔的RBC凝块聚集于孔中央，透光度小，而外周游离的RBC很少甚至没有，透光度大，透光度曲线呈“U”型，设定此类曲线为阳性参考曲线。非凝集孔的RBC均匀分布，透光度曲线平缓呈“-”型，设定此类曲线为阴性参考曲线，微孔板在酶标仪上读数后每孔的曲线与设定的参考曲线相比较，根据程序设定的ABO血型正反定型结果模式统计判定样本的血型 优点 1采用自动化加样，加样量精确、迅速 2酶标仪判读，血型结果自动打印 3由于离心、沉淀、振荡，提高了弱抗体的检出率 4试剂用量少，经济 5.降低了实验者的工作强度，减轻精神压力 酶处理试验技术 RBC表面唾液酸所带负电荷，使RBC之间保持相对稳定距离，IgG为单倍体，结合抗原跨度小于RBC间距离，不会引起凝集。 某些蛋白水解酶，可减少负电荷的数量。 最常用的酶有：木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶 原理 蛋白水解酶，作用于红细胞表面的多糖链，切断带有负电荷的羧基集团的唾液酸，减少红细胞表面负电荷，缩短红细胞之间的距离。 分类 一步法 二步法 三、微柱凝胶免疫实验 (Microcolumn gel immuno-assay MGIA) MGIA本质：是血凝实验，即红细胞抗原抗体在微柱腔内的凝胶介质中发生肉眼可见的凝聚反应。 抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离红细胞通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的。 卡式检测法（微柱凝胶试验） 法国Dr. Yves Lapierre在1990年首先发明的一项免疫学检测新技术，是微柱凝胶技术与以上所有实验技术相结合的产物。1994年此项技术获得了美国FDA（Food and Drug Administration ）的认可。经过不断改进和临床大量应用，目前，在多数发达国家，此项技术已作为常规的红细胞血型血清学检测技术应用于临床。 工作原理 微柱：柱体上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26-103 nm的葡聚糖凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过 缓冲液：低离子介质（加或不加抗血清） 工作原理 红细胞和抗血清加在凝胶上部,反应、低速离心后观察 凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性 游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱，而到达小柱的底部，证明未发生凝集，判断凝集反应阴性 微柱凝集试验技术分类 中性胶 特异性胶：含有特意性抗体 抗球蛋白胶：抗球蛋白胶，可进行IgG类抗体的检测 结果判读模式 4+：红细胞复合物位于胶表面。 3+：大部份红细胞复合物位于胶表面，小部分位于胶中上部。 2+：大小