慢性碘过量对Wistar大鼠甲状腺凋亡的影响-内科学专业毕业论文.docx

中国医科大学研究生学位论文独创性声明 中国医科大学研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或 其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名： 峨星立 日期： W们．f、p 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，印：研究生在 攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离 校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师 为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阕和借阕。学 校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩 印或其他手段保存论文。 论文作者签名： 暨：匦 指导教师签名： 壁鱼 一 一 一 ～中一一文一两疆 一 一 慢性碘过量对wistar大鼠甲状腺凋亡的影响 目 的 随着碘缺乏病的消除，各国关于甲状腺疾病发病率增加的报告逐渐增 多。2001年，WHO、UNlCEF、IcCIDD提出了依据学龄儿童尿碘评价碘营养 状态的流行病学标准。提出MuI 100一199微克／L是足够碘摄入量；200— 300微克／L是超足量碘摄人；300微克／L是碘过量。2001年我国居民的 碘摄入量(MuI 306微克／L)已经达到碘过量的标准。本课题组的流行病 学调查显示碘过量地区(MuI 374微克／L和MuI 614微克／L)的临床和亚 临床甲减患病率显著高于适碘地区(MUI 103微克／L)。自身免疫是临床 甲减的主要原因。而70％的亚临床甲状腺功能减退症与碘过量有关。 研究表明，碘过量对非易感个体的甲状腺细胞毒性作用与碘致甲状腺 凋亡有关而与免疫损伤无关。目前，碘致甲状腺细胞凋亡的分子机制众说 纷纭。2000年vitale研究碘过量对TAD一2细胞链和原代培养甲状腺细胞 凋亡的影响。结果表明碘通过ROs途径诱导细胞凋亡。2000年TamⅢa报 道，wistar大鼠甲肿形成期和消退早期细胞凋亡数及FaS表达增多；凋亡是 主要的致细胞数减少的机制。2002年杨长春发现过量碘介导豚鼠甲状腺 细胞凋亡，Bcl～2表达下调而Bax上调。smerdely P发现高浓度的碘通过 调节GOGl和G2M期阻滞细胞周期，抑制FRll．一5细胞增殖，促进细胞凋 亡。 综上，碘对正常甲状腺凋亡的影响及分子机制仍是内分泌学界争论的 焦点。但是，以往的动物实验采用的碘剂量过高，研究时间短。本研究的特 点是①模拟人群碘营养状态；②选择无甲状腺疾病遗传背景的普通动物。 目的是探讨轻中度碘过量对普通动物甲状腺凋亡的影响和凋亡途径以及限 制碘摄入后的变化情况，解释流行病学调查中发现的现象，为全民食盐加碘 政策提供实验依据。 方 方 法 一、动物： 正常对照组(NID)：普通饲料+双蒸水；高碘1组(HIDl)：普通饲料+ 含碘100斗g／L双蒸水(碘超足量组)；高碘2组(HID2)：普通饲料+含碘 400斗g／L双蒸水(3倍碘过量组)；高碘3组(HID3)：普通饲料+含碘 1000p∥L双蒸水(6倍碘过量组)；高碘4组(HID4)：普通饲料+含碘 3000斗g／L双蒸水(20倍碘过量组)；给处理因素后0、1、2、4、8个月处死动 物。8个月组的各组限碘3个月。 二、方法： 联合应用透射电镜、流式细胞术DNA定量技术和annexin V早期凋亡 检测技术以及TuNEL染色技术对细胞凋亡进行定性和定量分析；漉式细胞 术检测细胞内ROs水平；流式细胞术间接荧光标记和免疫组化染色检测凋 亡相关分子的表达；应用放免法测定大鼠血清TsH、n、FI，、风和1rI，。 采用砷铈催化分光光度法(GB／嘶82一1992)测定尿碘浓度。以sPSSll．5 进行统计学分析，多组比较采用单因素方差分析，两组比较采用￡检验。以 尸O．05为有统计学意义。 结 果 正常对照组的平均MUI为152．7斗g／L。各时点尿碘浓度与水碘浓度 显著正相关(r=o．815～o．949，P=O．000)。O、l、2个月时，各项检测指 标均无显著变化。 0、1个月时，甲状腺的早期凋亡率变化范围是(2．27±1．48)％至(3．83 ±1．88)％之间；2个月时轻度升高，为7．08±1．76)％和(9．32±2．28)％ 之间；4个月时，HID2(10．75±3，03)％和HID3(10．56±0．91)％组甲状腺