课件：药物分析三.ppt

2）高效液相色谱法 高效液相色谱法不仅分离效能高，而且 可以准确地测定各组分的峰面积，在杂质检 查中应用日益增多，特别是已使用高效液相 色谱法测定含量的药物，可采用同一色谱条 件进行杂质检查。 ①峰面积归一化法：计算各杂质峰面积及其 总和占总峰面积的百分率，不得超过限量。 注意：溶剂峰不能计算在总峰面积内。 优点：不需要对照品，简单易行。 缺点：杂质与药物的吸收程度不一致时，测 定误差大 。 ②不加校正因子的主成分自身对照法：当杂 质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时，可采 用主成分自身对照法。 检查时：按规定，将供试品溶液稀释成与 杂质限度相当的浓度，作为对照溶液。分别 取供试品溶液和对照溶液进样，计算供试品 溶液色谱图上各杂质峰面积及其总和，与对 照溶液主成分峰面积比较，以确定杂质是否 超过限量 。 判定：一般按2点 a 显示杂质峰的个数 b 各杂质峰面积及其总和分别于对照溶液主峰面积比较。 ③加校正因子的主成分自身对照法：将供试 品溶液稀释成与杂质限度相当浓度的溶液， 分别取供试品溶液和对照品溶液进样，供试 品溶液中各杂质峰面积总和与校正因子相乘 后与对照溶液主成分的峰面积比较，依法计 算各杂质的含量。 AS/CS 校正因子（f）=————— AR/CR Ax 含量（Cx）=f×————— As/Cs ④内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量 配制含有内标的供试品溶液，进样分析，测量 供试品中杂质和内标的峰面积。 与“加校正因子的主成分自身对照法”不同，此法 中的校正因子是通过选取药物和杂质以外的化合物 作为内标物测得的。测定时需要有杂质对照品。若 测定校正因子和测定供试品溶液采用同一份内标溶 液，则内标溶液不必准确配制。 ⑤外标法测定供试品中某个杂质的含量 配制杂质对照品溶液和供试品溶液，分 别取一定量注入色谱仪，测定对照品和供试 品中杂质的峰面积，按外标法计算杂质的浓 度。 3）气相色谱法 除药物中残留溶剂外，一 些挥发性特殊杂质也可以采用气相色谱法检 查。检查的方法与高效液相色谱法相同。 习题1、中国药典收载的HPLC法检查药物中杂 质的方法有 （CDE ） A、峰面积归一化法 B、加校正因子的主成分自身对照法 C、不加校正因子的主成分自身对照法 D、内标法加校正因子测定供试品中某个杂质含量 E、外标法测定供试品中某个杂质含量 2．肾上腺素中肾上腺酮的检查是利用（ A） A、对光吸收性质的差异 B、旋光性的差异 C、溶解行为的差异 D、颜色的差异 3、中国药典检查残留有机溶剂采用的方法为 （ D ） A、TLC法 B、HPLC法 C、UV法 D、GC法 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 浊度标准液配制： 表3-1 不同级号浊度标准液 级 号 0.5 1 2 3 4 浊度标准原液(mL) 2.5 5.0 10.0 30.0 50.0 水(mL) 97.5 95.0 90.0 70.0 50.0 中国药典规定：供试品溶液的澄清度与所用溶剂相同或未超过级号为0.5号浊度标准液时，为澄清。超过0.5浊度标准液时，则不澄清。 判断：中国药典规定：供试品溶液的澄清 度与所用溶剂相同或未超过0.5号浊度标准液 时，为澄清； 供试品溶液的乳色比0.5号明显，而不及 1级时，称为浊度0.5号；其余依此类推。。 供制备注射用的原料药物往往既要检查溶 液澄清度又要检查溶液颜色： 如华法林钠的检查：取本品0.20g，加丙 酮l0ml溶解后．溶液应澄清无色；如显浑浊 与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色， 置4cm吸收池中，采用分光光度法检查,在 460nm波长处测定的吸收度，不得超过0.12。 十二、酸碱度检查法 （一）酸碱滴定法：采用滴定的方法，以消耗酸或碱滴定液的毫升数作为限度指标。 例：NaCl的酸碱度 样品5.0g →水50ml溶解 →溴麝香草酚蓝(pH6.0-7.6,黄-蓝)指示液2滴， →若 显黄色（酸性）, 加0.02mol/L NaOH 滴定液0.1ml，应变兰色 →若 显蓝色或绿色（碱性）