课件：药物分析三杂质检查.ppt

3.高效液相色谱法(HPLC) （1）峰面积归一化法：L% = ∑Ai /(∑Ai + A主）×100% 例如：利巴韦林中有关杂质的检查： 对照品液(5μg/ml)进样10μl,调灵敏度，使主峰达满 量程的20%～25% 样品液(0.4mg/ml)进样10μl, 杂质∑Ai＜(∑Ai+A主） 的1.0% （2）不加校正因子主成分对照法 对照品液为供试品的稀释液进样测得A主 供试品液进样测得∑Ai 其∑Ai＜ A主即为合格. 例如:甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑: 对照品液(0.01mg/ml)进样20μl,调灵敏度，使主峰达10%～30% 样品液(0.14mg/ml)进样20μl,杂质∑Ai＜A主的1.0%. （3）内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量 对照品+内标 进样求校正因子（f)=(As/Cs)/(AR/CR) 供试品+内标 进样求AX.AS,则杂质浓度CX = f ×AX/(AS/CS) 4.气相色谱法(GC) 主要用于药物中挥发性的杂质检查，其检查方 法与HPLC法相同。 三、利用药物和杂质在化学性上的差异 （一）酸碱性的差异 1.规定消耗滴定液体积 例如己酸羟孕酮中正己酐、对甲苯磺酸检查：(NaOH 0.02mol/L) 取本品0.20g + 中性乙醇 + 溴麝香草酚蓝 微蓝色＜0.50ml 2.pH法 例如乙琥胺中2-甲基-2-乙基丁二酸检查：0.01g/ml pH3.0～4.5. 3.指示剂法 例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查：其水溶液不得使甲基橙显红 色。 （二）氧化还原性的差异 例如：NaCl中I-和Br-检查EOCl/2Cl- =+1.3595V ＞ EOBr/2Br- =+1.065V ＞ EOI/2I- =+0.5345V ,因此+NaNO2+H2SO4+淀粉显蓝色 例如：盐酸吗啡中阿朴吗啡的检查：后者可被碘氧化生成水溶性 绿色化 合物。因此ChP规定：本品50mg +4mlH2O+1dI2 + 5ml乙醚 乙醚层不得显红色；水层不得显绿色。 （三）杂质与一定试剂反应产生沉淀 例一、间苯二酚中邻苯二酚检查：后者+Pb(Ac)2 白色 ∴ ChP规定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸+0.5ml Pb(Ac)2 不得发生混浊，即为合格。 例二、硝酸毛果芸香碱中其他生物的检查：后者+氨水+K2Cr2O7 ∴ChP规定：本品0.2g+20mlH2O两份；I份+数滴氨试液；另 1份+数滴K2Cr2O7试液 ，均不得发生混浊。 （四）杂质与一定试剂反应产生颜色 例一、盐酸普萘洛尔中游离α-萘酚检查：利用后者可与重氮盐 发生重氮化-偶合反应，生成偶氮染料。 ∴ ChP规定：供试品20mg+乙醇与10%NaOH液各2ml+重氮苯 磺酸试液1ml,放置3min；如显色，与0.3ml α-萘 酚对照液（20μg/ml)比较不得更深。 例二、碘他拉酸中氨基化合物的检查：利用重氮化-偶合反应 ∴ChP规定：供试品2.5mg/ml经重氮化-偶合反应后，在波长 485nm测得A ＜0.25 （五）杂质与一定试剂反应产生气体 ChP附录中收载氰化物的两种检查方法： 第一法：改进普鲁士蓝法 原理：CN- + 酒石酸 HCN [Fe(CN)6]4- Fe4[Fe(CN)6] 第二法：气体扩散-三硝基苯酚锂法 原理：HCN扩散进入三硝基苯酚锂试液，生成异红紫酸盐，在 500nm波长处测定吸收度。 △ Fe2+ Fe3+ （六）药物经有机破坏后检查杂质 某些环状有机药物在生产中可能引入磷、硫、卤素及硒等杂 质， 这些杂质与有机分子中的碳原子以共价键结合，需进行有机 破坏后检查，各国药典所采用的方法为氧瓶燃烧法。(下章讨论) 1