（微生物学教学课件）病毒感染的检查方法与防治原则.ppt

灭活疫苗（inactivated vaccine） 活疫苗（living vaccine） 重组载体疫苗（recombinant carrier vaccine） 亚单位疫苗（subunit vaccine） 化学提取或人工合成疫苗 重组疫苗（recombinant vaccine） 核酸疫苗（nucleic acid vaccine） 一、人工主动免疫常用生物制品 二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白 血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂 IFN-α、β、γ 细胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF 、CSF 淋巴因子激活的杀伤细胞 ——LAK细胞 病毒感染的治疗 核苷类药物 非核苷类反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂 其他抗病毒药物 干扰素和干扰素诱生剂 中草药 基因治疗剂 治疗性疫苗 抗病化学制剂 反义寡核苷酸 干扰RNA 核酶（ribozyme） 思考题 分离病毒的标本和作血清学诊断的标本各有何要求？ 常用组织培养法有几种？各有何应用？ 病毒在组织细胞中增殖的指标是什么？ 病毒性感染的快速诊断方法有哪些？ 预防病毒性感染有哪些人工自动免疫制剂？ 诊断病毒的核酸技术有哪些？ 病毒感染的检测与防治原则 第一节 病毒感染的检查 病毒感染的检查 检测内容 查病毒 查特异性抗体 病毒颗粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶 电镜直接观察 光镜检查包含体 分离培养 一、标本的采集与送检 原则基本与细菌相似，但应注意： 1.标本用“双抗”或两性霉素B处理 2.低温保存，尽快送检 3.血清学诊断采双份血清 二、病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离培养 细胞培养（cell culture） 鸡胚接种（egg inoculation） 动物接种（animal inoculation） 二、病毒的分离与鉴定 一般程序： 标本 无菌处理 动物接种 鸡胚培养 细胞培养 指标阳性 指标阴性 病毒鉴定 盲传2～3代 指标阴性 病毒阴性 （一）病毒的分离培养 1.细胞培养 单层细胞培养（monolayer cell culture） 分类 悬浮细胞培养（suspended cell culture） 原代细胞（primary cell） 细胞种类 二倍体细胞（diploid cell） 传代细胞系（continuous cell line） 病毒的细胞培养 细胞培养瓶 单层细胞 1.细胞培养 (1)原代和次代细胞培养 组织 组织块 分散的单个细胞 单层细胞 剪碎 培养基 (原代细胞) 单层细胞 (次代细胞) 传代培养 蛋白酶 特点：①对多种病毒敏感 ②生长能力有限, 获取成本高 ③可携带潜伏病毒 1.细胞培养 (1)原代和次代细胞培养 (2)二倍体细胞培养 体外分裂50～100代仍保持二倍体染色体数目，可用于病毒分离和疫苗生产。 特点：①对多种病毒敏感 ②不带异种蛋白(人源性) ③不带病毒，无致瘤潜能 ④可传50代左右 1.细胞培养 (3) 传代细胞培养 特点：①对多种病毒敏感性高 ②繁殖能力高，传代时间长 ③有致癌危险，不能用于疫苗生产 1.细胞培养 2.鸡胚培养 采用孵化9～14天的鸡胚 绒毛尿囊膜（allantocherion） 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔（allantoic cavity） 接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔（amniotic cavity） 流感病毒的初次分离 卵黄囊（yolk sac）