2019-2020年江苏专版高考生物一轮复习第十三单元基因工程第41课时基因工程概述讲义.pptVIP

考向一　以选择题的形式考查限制酶的作用和特点 1.(2015江苏南京期中,21,2分)对如图所示DNA片段的说法不正确的是? (　????) ? A.甲、乙、丙的黏性末端是由三种限制酶催化产生的 B.甲、乙之间可形成重组DNA分子,但甲、丙之间不能 C.DNA连接酶催化磷酸基团和核糖之间形成化学键 D.切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子 切割产生乙的限制酶的识别序列为:CAATTG∥GTTAAC,切割产生丙的限制酶的识别序列为:CTTAAG∥GAATTC,由此可见,甲、乙、丙的黏性末端是由三种限制酶催化产生的,A正确;甲、乙的黏性末端相同,因此可在DNA连接酶的作用下形成重组DNA分子,但甲、丙的黏性末端不同,它们之间不能形成重组DNA分子,B正确;DNA连接酶催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键,C错误;切割甲的限制酶的识别序列为:GAATTC∥CTTAAG,而甲、乙片段形成的重组DNA分子序列为:GAATTG∥CT-TAAC,因此切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子,D正确。 ?答案????C　切割产生甲的限制酶的识别序列为:GAATTC∥CTTAAG, 考向二　以选择题的形式考查载体的知识 2.(2015江苏淮安期中,5,2分)下列有关基因表达载体的叙述,不正确的是? (　????) A.具有复制原点,使目的基因能在受体细胞内扩增 B.具有启动子,使DNA聚合酶识别并开始转录 C.具有标记基因,有利于鉴别受体细胞中是否导入目的基因 D.具有目的基因,以实现产生特定的基因产物 ?答案????B　基因表达载体具有复制原点、启动子、目的基因、终止子 和标记基因。复制原点使目的基因能在受体细胞内扩增。启动子是RNA聚合酶的结合位点。标记基因可用于鉴别受体细胞中是否含有目的基因。目的基因表达可合成特定的基因产物。 3.(2015江苏泰兴一中段考,15,2分)下图为基因表达载体模式图,下列相关叙述正确的是?(　????) ? A.甲表示启动子,位于基因的首端,它是DNA聚合酶识别、结合的位点 B.乙表示终止密码子,位于基因的尾端,作用是使转录过程停止 C.丙表示目的基因,其作用是获取人们需要的性状 D.复制原点的存在有利于目的基因在宿主细胞内扩增 ?答案????D　甲表示启动子,位于基因的首端,它是RNA聚合酶识别、结 合的部位,A错误;乙表示终止子,位于基因的尾端,作用是使转录过程停止,B错误;丙表示标记基因,其作用是鉴别受体细胞中是否有目的基因,C错误。 方法 从基因文库中获取 人工合成 从部分基因文库,如 cDNA文库中获取 化学合成法 逆转录法 突破二　基因工程的操作过程 1.几种目的基因的获取方法 过程 供体细胞 中的DNA ? 许多DNA 片段 ? 载体 ? 受体菌群(基因组文库) ? 外源DNA扩增,产生 特定性状目的基因 目的基因 的mRNA ? 单链DNA ? 双链DNA ? 载体 ? 受体菌群 (cDNA文库) ? 目的基因 蛋白质的氨 基酸序列 ? mRNA的 核苷酸序列 ? 结构基因的 核苷酸序列 ? 目的基因 目的基因的 mRNA ? 单链DNA ? 双链DNA 即目的 基因 ?知能拓展????如果目的基因的序列是已知的,可用化学方法合成目的基因, 或者用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。如果目的基因的核苷酸序列是未知的,可以从基因文库中获取。 2.形成重组DNA分子 ? (1)目的基因是指编码蛋白质的外源DNA分子,没有启动子,若只将目的基因导入受体细胞中无法转录。 (2)目的基因的表达需要调控序列,因而用作载体的质粒插入目的基因时须有启动子,插入后须有终止子。 (3)要确定目的基因是否导入受体细胞,需要有筛选标记——标记基因。 ?易混辨析????①载体与基因表达载体的区别:与载体相比较,基因表达载体 增加了启动子、目的基因和终止子三个基因片段,其功能各不相同。 ②启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA);终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。 3.转化受体细胞 (1)目的:使目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表达。 (2)导入方法 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 氯化钙处理法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 转化过程 目的基因插入Ti质粒的 T-DNA上→进入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达 将重组DNA分子提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有