2019-2020年江苏专版高考生物一轮复习第十五单元生物技术实践第47课时微生物的分离和培养讲义.pptVIP

? 1.选择培养基及其应用 (1)选择培养基:培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。目的是培养、分离出特定微生物。 (2)选择培养基应用实例 ①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 ②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 ③培养基中缺乏氮源时,可以分离得到固氮微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。 ④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。 ⑤改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养得到耐高温的微生物。 2.纯化大肠杆菌的注意事项 (1)倒平板操作的注意事项 ①培养基灭菌后,需冷却至50℃左右时才能倒平板。 ②左手拿培养皿,右手拿锥形瓶,左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开。 ③整个操作在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。 ④平板冷凝后要倒置,以防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染。 ⑤若倒平板时,培养基溅在皿盖和皿底之间的部位,这个平板应丢弃。 (2)平板划线操作的注意事项 ①第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环,划线操作结束时,仍需灼烧接种环。每次灼烧目的如表所示: 第一次划 线前灼烧 每次划线之前灼烧 划线结 束时灼烧 目的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养基 杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种直接来源于上次划线的末端 杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者 ②接种环灼烧后,要冷却后才能接触菌种,以免温度太高杀死菌种。 ③划线时最后一区域不要与第一区域相连。 ④划线时用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。 (3)稀释涂布平板 ①系列稀释操作(如图1) ? 图1 ②涂布平板操作(如图2) ? 图2 ③注意事项 a.稀释操作时,每支试管及其中9 mL水、移液管均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰l~2 cm处;移液管头不要接触任何物体。 b.涂布平板时,涂布器用体积分数为70%的酒精消毒,取出时,多余酒精在烧杯中滴尽,后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免点燃其中的酒精。酒精灯与培养皿距离要合适。 比较项目 平板划线法 稀释涂布平板法 关键操作 接种环在固体平板培养基表面连续划线 ①一系列的梯度稀释 ②涂布平板法操作 注意事项 每次划线先后均需灼烧接种环 稀释度要足够高,为确保实验成功可以增加稀释度的范围 菌体获取 在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体 从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 优点 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数 缺点 不能对微生物计数 操作复杂,需要涂布多个平板 3.纯化微生物的接种方法 考向一　以选择题的形式综合考查培养基成分和配制 1.下列叙述正确的是?(　????) A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基 C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌 ?答案????A　培养基是为人工培养微生物而制备的、提供适合微生物生 长、繁殖或积累代谢产物的营养基质;培养基的种类根据划分依据的不同而不同,如根据化学成分的不同可以分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基等。固体培养基是液体培养基添加凝固剂形成的,其他成分均与液体培养基相同。微生物形体微小,肉眼无法看到,必须借助仪器才能看到,在固体培养基上用肉眼观察到的是一个菌落。 2.(2015江苏泰州一模,15,2分)下列关于制备牛肉膏蛋白胨培养基的叙述,错误的是?(　????) A.培养基应先调pH再进行灭菌 B.培养基应先灭菌再分装到培养皿 C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦 D.高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓 ?答案????D　制备培养基时,需先调节pH,再灭菌,A正确;灭菌后的培养基 才能进行分装,B正确;溶化琼脂时不能使培养基溢出,以防培养基被污染,也不能烧焦,C正确;高压蒸汽灭菌锅加盖时应对称旋紧螺栓,D错误。 考向二　以选择题的形式考查无菌操作技术及纯化微生物的接种技术 3.用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌。二者的共同点有?(　????) ①可以用相同的培养基 ②都要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌