盾叶薯蓣药材甾体总皂苷成分HPLCELSD指纹图谱探究.docxVIP

盾叶薯菽药材笛体总皂昔成分HPLC—ELSD ■==i 指纹图谱探究 ［摘要］建立不同产地盾叶薯菽药材中窗体总皂昔 成分HPLC-ELSD指纹图谱的方法。采用We 1 chrom C18(4. 6 mm X250 mm, 5 um)色谱柱，乙睛(A)-水(B)作为流动 相，梯度洗脱；柱温室温；体积流速1.0 niL?min-1；蒸发 光散射检测器条件：漂移管温度90.0 °C,载气(N2)流速 2. 8 L?min-1；进样体积10 uLo通过检测10个批次盾叶 薯筋药材，首次建立了盾叶薯赣笛体总皂昔成分HPLC-ELSD 指纹图谱的共有模式，确定了 25共有峰，并利用对照品对 照法对其中的10个共有峰进行了成分指认。以共有模式对 10批药材进行相似度评价，其相似度全部大于0.80。该方 法准确、可靠、重复性好，为全面评价和控制盾叶薯菽药材 的质量提供了科学依据。 ［关键词］盾叶薯裁；傷体总皂昔;HPLC-ELSD；指纹图 谱 盾叶薯筋 Dioscorea zingiberensis C. H. Wright 又名 黄姜、火头根、枕头根［1-2］,为薯菽科薯菽属多年生草本 缠绕性植物，为我国特有种［3-5］ o其根茎中的薯赣皂昔元 是合成避孕药、笛体激素类药物的重要原料，含量高达 16. 15%,是目前世界上最好的激素类来源的天然药物［6-7］ o 盾叶薯籁性味甘、苦、凉[8],具有清肺止咳、利湿通淋、 通络止痛、解毒消肿等功效，民间用于治疗皮肤急性化脓性 感染、软组织损伤、蜂堇、虫咬及各种外科炎症[9-10] o盾 叶薯菽根茎中的主要活性成分为皂昔类化合物，具有镇咳、 平喘、降低胆固醇、预防动脉硬化、抗癌等作用[11-13], 其在盾叶薯菽中质量的好与坏，直接影响着盾叶薯裁的药理 作用。 目前盾叶薯筋的质量控制手段主要采用高效液相色谱 法对已知化合物（如薯菽皂昔、纤细皂昔、盾叶新昔和黄姜 素A等）进行含量测定[14-17],仍采用了对化学药品质量 控制的模式，众所周知，单一或少数几个指标性成分的含量 测定往往难以反映中药整体质量。由于受到天气、气候和产 地等各种因素的影响，盾叶薯籁中笛体总皂昔活性成分的含 量会有较显著的差异，从而影响其质量。为了更好地控制盾 叶薯筋的质量，本实验首次建立了盾叶薯筋中笛体总皂昔 HPLC-ELSD指纹图谱分析的方法[18],以期为盾叶薯籁药材 的药效和质量控制等方面提供理论基础和实验依据。 1材料 1.1仪器 Waters 2695型高效液相色谱仪（包括四元泵、真空在 线脱气机、自动进样器、柱温箱和Empower色谱工作站）； Alltech 2000E型蒸发光散射检测器（ELSD,美国Alltech 公司）；SE-96自动纯水蒸馆器；KQ-100DE型数控超声波清 洗器（昆山市超市仪器有限公司）；Sartorius BP211D型电 子天平（德国赛多利斯公司）；中药指纹图谱相似度评价系 统2004版A （国家药典委员会）。乙睛为色谱纯（德国默克 公司），水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。 1.2试药 共有峰归属所用对照品为26-0-B-D-毗喃葡萄糖基- （25R）-咲脩烷-5-烯-3B , 22 0, 26-三醇-3-0-[ 0 —D-毗 喃葡萄糖基-（1-3） -a-L-毗喃鼠李糖基-（1-2） ]-B-D- 毗喃葡萄糖昔（化合物A）,甲基原薯菽皂昔（化合物B）, 26-0- 3 -D-毗喃葡萄糖基- （25R） -咲笛烷-5, 20 （22） -双 烯-3 B , 26-二醇-3-0- {a-L-毗喃鼠李糖基-（1 - 4 ） - [ B -D- 毗喃葡萄糖基-（1-3 ） - B -D -毗喃葡萄糖基- （1-2） ]}-B-D-毗喃葡萄糖昔（化合物C）,黄姜素A （化 合物D）, 26-0-B-D-毗喃葡萄糖基- （25R） -咲笛烷-5-烯 -3 B , 22 Z , 26-三醇-3-0- [ a -L-毗喃鼠李糖基- （1-4） 毗喃葡萄糖昔（化合物E）,盾叶新昔（化 合物F）,三角叶薯锁皂昔（化合物G）,薯菽皂昔（化合物H）, 纤细皂昔（化合物I）, 胡萝卜昔（化合物J）均由本实 验室分离获得（采用13C-NMR和MS等光谱学方法确定其结 构，并经HPLC-ELSD峰面积归一化法测得其纯度均大于95%）。 试验用不同盾叶薯菽药材采集自陕西省不同县区，经西北大 学生命科学学院王亚洲副教授鉴定为薯菽科薯祯属盾叶薯 菽D. zingiberensis的干燥根茎,10批次药材来源见表1。 2方法和结果 2. 1 色谱条件 We lehr om C18 色谱柱(4. 6 mmX250 mm, 5 urn),采用乙睛(A) -水(B)梯度洗脱(0?5 min, 25%? 30%A； 5?