接种物制备 细菌生长曲线 迟缓期:菌体增大,代谢活跃,为细菌的分裂增值合成、储备足够的酶、能量及中间代谢产物,1-4h 对数期:此期细菌形态、染色、生物活性都很典型,对外界环境因素的作用敏感,抗菌素作用对该时期的细菌效果最佳,8-18h 稳定期:此期细菌形态、染色、生物活性可出现改变,并产生相应的代谢产物 衰亡期:生理代谢活动趋于停滞 接种物制备 制备方法 直接菌落悬浮法:最方便的方法。可用于大多数细菌。 从16-18h培养的琼脂平板(应选用非选择性培养基,如血平板)上挑取数个单个菌落 直接接种到肉汤或生理盐水制成菌悬液,调整菌悬液至0.5麦氏。 接种物制备 制备方法 生长法:无法用上述方法制备菌悬液的情况下选用。 从琼脂平板上选择3-5个形态相同的单个菌落,用接种环或无菌拭子将菌落转移至含有4-5ml合适的肉汤培养基的试管中,如胰蛋白酶大豆肉汤。在35℃孵育培养,直到达到或超过0.5麦氏浓度(通常2-6h)浊度。 用无菌生理盐水或肉汤调整新鲜生长的肉汤悬液的浊度到0.5麦氏浓度。 试验操作 接种平板: 调整好浊度的菌悬液最好在15min内将无菌棉签浸取,同时在管壁上出去棉签上多余的液体 用拭子划线整个琼脂表面,接种于表面干燥的MHA平板上,每次旋转平板约60°,以确保每次接种均匀分布,最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈 盖子可半开3-5min,但不可超过15min,以便放置药敏纸片
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