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植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术,近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入,发展极为迅速,发表的文献浩如烟海,几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。 发展简史 1838-1839年,德国科学家Schleide 和Schwann发表了细胞学说,奠定了组织培养的理论基础。 1902年,德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说,提出单个细胞的植物细胞全能性(totipotency)理论。 1904年,Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。 1958年,英国科学家Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养,成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株,不但使细胞全能性理论得到证实,而且为组织培养的技术程序奠定了基础。 1962年,Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。 1964-1966年,印度科学家Guha 和Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。 1972年,Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养,获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。…… 外植体 植物体 愈伤组织 根、芽 (胚状体) 脱分化 再分化 生长 离体的植物器官、组织或细胞 生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂 包裹上人造种皮,制成人工种子 排列疏松而无规则,高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞 试管苗的快速繁殖、培育无病毒植物 细胞分裂素和生长素 应用领域 1、快速繁殖 运用组织培养的途径,一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株。例如一株葡萄一年繁殖到3万多株,一株兰花一年繁殖到400万株。 2、种苗脱毒 针对病毒对农作物造成的严重危害,通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗。已经取得成功的有马铃薯、草莓、香蕉、葡萄等等。 3、突变育种 采用组织培养可以直接诱变和筛选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种。象中国林科院用逐步加大培养基中盐的浓度,直接获得耐盐的杨树株系。 4、远缘杂交 利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功,从而育成一些罕见的新物种。比如辽宁果树研究所利用这种方法获得苹果与梨的杂交种。 原生质体A 原生质体B 去掉细胞壁 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞AB 细胞分裂 克服远源杂交不亲和的障碍 大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围 1、离心、振动、 电刺激 2、聚乙二醇 白菜和甘蓝两种植物之间存在着生殖隔离,不能进行传统的有性杂交。那么如何得到如图这样的“白菜——甘蓝”植株呢? 智能训练 社会 科学 基 础 推 动 应用 Science Technology Society 动物细胞工程 植物细胞工程 技术 细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 小结 谢 谢 应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体或细胞器水平,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 脱分化(dedifferentiation):已经分化组织的并停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性。 再分化(redifferentiation):脱分化所形成的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成芽或根等器官。这个过程叫做再分化。 植物细胞工程 1975年美国的查可巴瑞成功地在培养基上将4种降解性质粒转到1株细菌的细胞内,构建成举世瞩目的第一个“超级菌”。该种超级菌能同时降解7种以上的石油烃类化合物,几小时内的效果相当于自然菌株一年以上的同等水平。1982年他又实现了细胞间质粒的自然传递和相互作用,构建出新的超级菌,新超级菌清除石油污染所需时间不到传统方法的10%,消耗费用仅为传统方法的35%。 结合基因工程成果和展望的知识,简述“超级细菌”的培育过程。 可以将三种假单孢杆菌与第四种假单孢杆菌融合或将其内的细胞器移入第四种假单孢杆菌内,使之具有分解四种烃类化合物的功能。 用基因工程的方法,把能分解三种烃类的基因通过运载体都转移到能分解另一种烃类的假单孢杆菌类,从而创造出能分解四种烃类的“超级细菌” 思考 设想 社会 科学 基 础 推 动 应用 Science Technology Society 动物细胞工程 植物细胞工程
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