线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作方法的改进.pdfVIP

DOC格式论文，方便您的复制修改删 线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作方法 的改进 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 作者：吴培要, 王 静, 谢丽芬, 张贵林, 任光友 【关键词】 大脑中动脉 ，脑缺血 ； 模型 ，动物 ； 大鼠 ， Sprague-Dauley ；改良线栓法 缺血性脑血管病的基础研究需要建立简便有效的动物模型，制备局 灶性脑缺血模型的方法有很多种，常用的有经颞下或经眶入路夹闭或 电凝大脑中动脉(MCA)、光化学诱导血栓形成等。目前，国内外广泛 应用的另一种方法是颈内动脉(ICA)线栓法。可逆性线栓大鼠大脑中 动脉缺血模型适于脑梗死缺血半暗区病理生理研究、影像学研究、缺 血再灌注损伤机制和脑保护药物研究。但是，据国外文献报道，可逆 性线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作成功率不高（为30% ～70% ）， 且模型的神经功能评分变异较大[1]。鉴于此，在经多次预试验的实践 基础上，对可逆性线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作进行改进，以图 提高其成功率和稳定性，增加实验结果的可靠性。 1 材料与方法 DOC格式论文，方便您的复制修改删减 1.1 实验材料 显微镊、手术刀、止血钳、微动脉夹、尼龙线、开口器、大鼠 固定器、油性记号笔、直尺等。水合氯醛 （AR ，天津市大茂化学试 剂厂，批号）；SPF 级 SD 大鼠60 只，雌雄兼用，体重 280 ～320 g ，由重庆市中药研究院动物中心提供，许可证号：SCXK （渝）2007-0006[2]。 1.2 实验方法 1.2.1 栓子制作 将尼龙线剪成长4~5 cm 线段，一端加热呈圆球状 （直径0.28 mm 左右）制成栓子[1 ，3]。用黑色油性记号笔在圆球头 端及距离圆球头端1.8~2.0 处各作一记号备用。 1.2.2 动物分组 将60 只大鼠随机分成传统方法组和改良方法组， 每组30 只。 1.2.3 模型制作 传统方法制作模型（传统组）：大鼠麻醉（腹腔注 射10% 水合氯醛，0.35 ml/100 g[4]) ，取颈正中切口，撕裂胸骨舌 骨肌并暴露气管，从气管右侧分离颈总动脉（ CCA ）、颈外动脉 （ECA ）、颈内动脉（ICA ）、枕动脉；结扎枕动脉，分离颈内动脉（ICA ） 及颅外分支翼腭动脉。在ECA 下穿线两根，线一离CCA 分叉处3 mm 结扎不剪断，线二不打结以供牵拉备用；动脉夹分别夹闭CCA、ICA ， 于两线之间的ECA 剪一切口，将栓子由此口插入，松开ICA 上动脉 夹，栓子分别经CCA 分叉处、ICA、大脑前动脉（ACA ），终至大脑 中动脉（MCA ），以阻断MCA 血流。自ICA 起始部算，栓子插入深 度约为18~20 mm。用线一结扎固定栓子后，松开CCA 上的动脉夹； DOC格式论文，方便您的复制修改删减 缝合肌肉和皮肤（腹腔注射青霉素，4 万单位/只，预防术后感染）， 动物回笼饲养，保持大鼠肛温37.5 ℃[1 ，3 ，5~11]。见图1。 改良方法制作模型（改良组）：大鼠麻醉，于颈正中偏右2 mm 切 开，沿胸骨乳突肌和胸骨舌骨肌肌间隙钝性分离出右侧 CCA ，再分 离出右侧ECA ，穿线后轻轻提起，分离ICA 和枕动脉；烧灼法离断 枕动脉，在ECA 下穿线2 根，线一离CCA 分叉处3 mm 结扎不剪 断，线二不打结以供牵拉备用；动脉夹夹闭CCA、ICA。于2 根线之 间的ECA 剪一切口，将栓子由此口插入，进入ICA 约5 mm ，轻轻 提起CCA 上动脉夹并往鼠尾方向稍牵拉，用显微镊轻轻往鼠头方向 拨动ICA ，栓子继续前行至MCA。余操作步骤同传统方法。 手术操作采用 1 只传统组大鼠完成后接着 1 只改良组大鼠， 如此依次循环。 1.3 观察指标 1.3.1 动物模型神经功能评分 制模成功的标准是动物出现明确的 右侧大脑中动脉缺血的神经功能症状，按 Longa 的 5 分法进行评 判，计算两组动物模型的分值。0 分(0 级):无神经功能缺损症状；1 分(Ⅰ级):轻度局灶性神经功能缺损，即提尾悬空不能伸展左侧前爪；2 分(Ⅱ级): 中度局灶性神经功能缺损，即行走向左侧