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蛋白质等电点的应用 化学系化学专业 2 班 罗佳 蛋白质等电点的应用 ? 等电点 ? 等电点时蛋白质的特殊性质 ? 主要应用 等电点沉淀与分离 电泳分离 等电聚焦电泳 ? 目前研究应用情况 等电点的测定 等电点 以氨基乙酸为例 , 离解平衡为 : 氨基乙酸 Ka 1 双极离子 Ka 2 氨基乙酸 阳离子 pI=1/2(pKa 1 +pKa 2 ) 阴离子 当氨基酸的各种带电离子所带正电荷数与负电 荷数相等时 , 此时溶液的 pH 就是这种氨基酸的等电 点 (pI). 蛋白质是由氨基酸组成的 , 除了有末端 -NH 3 + 和 末端 -COO - 外 , 参与其组成的氨基酸残基侧链上还有 酸、碱性基团 , 因此蛋白质是两性物质 , 也有等电点 . 2 2 3 3 3 2 3 2 2 2 H O H O H O H O NH CH COOH NH CH COO NH CH COO ? ? ? ? ? ? 阴 极 阳 极 pH=pI pHpI pHpI 带正电荷 带负电荷 净电荷为零 导电率 溶解度 渗透压 粘度 达到最低 等电点时蛋白质的特殊性质 原因 : 在等电点时,蛋白质分子以双极离子存在,总净 电荷为零 , 颗粒无电荷间的排斥作用 , 易凝集成大颗粒, 因而最不稳定,溶解度最小,易沉淀析出。 电泳分 离 沉淀分离 …… 等电点的测定 ? 从理论上讲 , 一种蛋白质只有一个等电点 , 但等电 点测定结果受实验方法和条件 ( 溶剂性质、离子 强度等 ) 影响较大, 一种蛋白质也可能具有多个 等电点。 ? 在《抗 HBsAg 单链抗体的等电点测定和结构模 拟》这篇文章中 , 作者指出:“很多学者发现 , 经 过各种色谱均证实为纯品的重组蛋白在等电聚焦 时表现为多条带 , 这种现象的出现可能与蛋白质空 间构象的差异有关 .” 影响蛋白质等电点的因素有很多 谢 谢!
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