10.4中药的含量测定.pdf

中药的含量测定 内 容  中药的含量测定方法  薄层色谱法  方法学验证 中药的含量测定方法 含量测定指用适当的化学方法或仪器分析方法对中药及其 制剂某种（些）有效成分或有效部位进行定量分析，判断 药品优劣和评价药品质量。 常见方法：化学分析法和仪器分析法。 化学分析法包括容量分析和重量分析法 仪器分析法包括高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管 电泳。仪器分析方法更为常用。 薄层色谱法  薄层色谱法是中药的含量测定常用方法  原理： 用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有紫外 或可见吸收的斑点或经照射能激发产生荧光的斑点进行 扫描，将扫描得到的图谱及积分值用于药品定性定量分 析。 薄层扫描仪示意图  扫描方式 单波长 双波长  单波长适用于荧光测定法，即用某一波长的紫外光 （激发光）进行扫描。  双波长主要用于吸收测定法。通过双波长可消除背 景干扰。  光源 – 氘灯：用于紫外测定，200~400nm 。 – 钨灯：用于可见光测定，350~800nm 。 – 氙灯：发射不连续光谱，常用波长为365 nm ，用于荧光测 定 单波长 双波长  薄层扫描法有外标法和内标法。 外标法 测定原理为将供试品溶液和对照品溶液分别点加在同一块 薄层板上，展开，显色，定位，扫描被测成分和对照品斑 点，测得相应的吸收度或荧光强度积分值，根据定量关系， 计算出被测成分的含量。  外标一点法：标准曲线通过原点，采用外标一点法。直线 方程为 C=FA ，F为斜率。马钱子散等个别品种。  外标两点法：标准曲线不通过原点，直线方程为C= F A+F2 ， 1 F F 1为斜率， 为截距。 2 示例1：九分散中士的宁的含量测定  九分散是由马钱子粉、麻黄、乳香和没药等制成。  马钱子粉中含有士的宁、番木鳖碱等生物碱，具生理活性 但也有毒性，故需控制马钱子含量。  中国药典规定按干燥品计每包含马钱子以士的宁计应为 4.5～5.5 mg。 溶液制备： 取本品10 包 混合研匀 精密称取2 g置具塞锥形瓶中 精密加氯仿20 ml与 轻轻摇匀，称重 于室温下放置24 h 浓氨试液1 ml 称重 补足氯仿减失的重量 充分振摇，滤过 精密量取滤液10 ml 硫酸溶液（3→300）分次提取，至生物 碱提尽 合并硫酸液，置另一分液漏斗中 加浓氨试液使呈碱性 用氯仿分次提取，合并氯仿液 蒸干，放冷 残渣中精密加 氯仿5 ml使溶 解 对照品溶液：每1 ml含0.4 mg士的宁氯仿溶液  测定法： 吸取上述两种溶液各5μl ，分别点于同一硅胶GF254薄层板 上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液（16 ∶12 ∶1 ∶4）的上层溶液 为展开剂，展开，取出，晾干。 扫描测定波长为λs=254 nm ，λR=325 nm ，测量供试品吸收 度积分值与对照品吸收度积分值，按外标法计算含量。 士的宁对照品纯度薄层图谱 士的宁对照品薄层图谱 图片出处：梁建宁. 薄层色谱法扫描测定康宁胶囊士的