AVP（4-8）改善APP_PS1阿尔茨海默病小鼠认知行为及海马突触可塑性的实验研究.pdf

目 录 中文摘要I 英文摘要IV 前言1 第一部分 AVP(4-8)对APP/PS1-AD 模型小鼠认知行为功能的影响3 1 材料与方法3 1.1实验动物、分组及给药3 1.2 实验方法4 1.2.1Y 迷宫自发交替实验4 1.2.2Morris水迷宫实验4 1.3 统计学处理5 2 结果6 2.1AVP(4-8)提高了APP/PS1小鼠在Y 迷宫中的短期工作记忆能力6 2.2AVP(4-8)改善了APP/PS1小鼠的长期空间学习和参考记忆能力7 第二部分 AVP(4-8)对APP/PS1-AD 模型小鼠海马突触可塑性的影响10 1 材料与方法10 1.1主要仪器10 1.2 小鼠在体海马LTP 记录方法10 1.3 统计学方法12 2 结果13 2.1AVP(4-8)部分逆转了APP/PS1小鼠海马CA1区LTP 的抑制13 2.2AVP(4-8)对小鼠海马CA1区的PPF 没有影响13 第三部分 AVP(4-8)对APP/PS1-AD 模型小鼠突触相关蛋白以及神经营养因子的影 响15 1 材料与方法15 1.1 试剂与仪器15 1.1.1 主要仪器15 1.2.3 主要试剂16 1.2Westernblot 实验方法16 1.3ELISA 实验方法 17 1.4 统计学方法17 2 结果18 2.1AVP(4-8)增加了APP/PS1小鼠海马SYP 和PSD95 的含量18 2.2AVP(4-8)上调了APP/PS1小鼠海马NGF 的水平19 讨论21 参考文献24 综述30 致谢48 个人简历49 山西医科大学硕士学位论文 AVP(4-8)改善APP/PS1 阿尔茨海默病小鼠 认知行为及海马突触可塑性的实验研究 摘 要 目的： 神经生理及脑内化学物质的紊乱是阿尔茨海默病 （Alzheimer’sdisease，AD） 学习记忆功能进行性减退的重要原因。有研究发现，AD 患者与学习记忆相关的脑 区如海马中精氨酸加压素 （argininevasopressin，AVP）的水平明显降低，而AVP 具有促进学习记忆功能的作用。AVP(4-8)是AVP 在脑内的代谢产物，它不仅丧失了 其前体所具有的升压和抗利尿外周效应，而且在神经保护活性上比其前体AVP 高得 多，并表现出高度的中枢选择性。但是，AVP(4-8)对于AD 的作用尚不明确，也未 见有关AVP （4-8）用于AD 动物或病人的研究报道。因此，本研究首先通过行为 学实验观察了AVP(4-8)对APP/PS1-AD 模型小鼠认知行为的影响；在此基础上，采 用电生理技术记录了与记忆行为密切相关的在体海马长时程增强 （LTP），观察了 AVP(4-8)对海马突触可塑性的调节作用；最后，我们还通过Western blot 和ELISA 实验检测了脑内与突触传递等神经元功能活动密切相关的蛋白如SYP、PSD95和神 经生长因子NGF 的表达水平，以揭示AVP(4-8)发挥神经保护效应的可能机制。 方法： 将8月龄的APPswe/PS1 (APP/PS1)-AD 模型小鼠和野生型 （wild-type,WT） dE9 C57BL/6 小鼠随机分为四组：WT+Saline 组、WT+AVP(4-8)组、APP/PS1+Saline 组 和APP/PS1+AVP(4-8)组，每组10-13 只。用10 μl 的微量进样器经鼻腔给药，每次 2 μg/kg，一日3 次，持续给药4 周。此后，依次进行Y 迷宫实验、Morris 水迷宫实 验和在体海马LTP 实验。实验期间，持续给药。最后断头取脑，进行Western blot 实验和ELISA 实验。 Y 迷宫自发交替实验：统计8min 内各组小鼠总的进臂次数和进臂自发交替正 确率。进臂自发交替正确率越高表明该组小鼠的工作记忆能力越强。