微透析-液相色谱-化学发光联用微透析技术应用于中药药动学研究.pptVIP

; ;个人简历; 化学发光[1]作为一种自然现象很早就为人类所注意 1877年，Radziszewski[2] 证实在乙醇－KOH溶液中洛粉碱(Lophine, 2,4,5-三苯基咪唑)被H2O2等氧化发出绿光 十九世纪末期，德国科学家Wiedemann[3]首次解释了化学发光的机制;[4] R. Dubois, Acad. Sci. 132 (1901) 431. [5] K. van Dyke, F. McCapra, I. Behesti, Bioluminescnece and Chemiluminescence, Instruments and Applications. Vol 1. FL: CRC Press, 1985. [6] K. Gleu, Z. Petsch. Angew. Chem. 48 (1935) 57. ;由于大多数化学发光非常微弱，且稍纵即逝，早期的化学发光研究主要集中在对化学发光反应现象的观察和反应机理的探讨上，其发展一直比较缓慢。 1945年出现了光电倍增管，1950年出现了商品化的化学发光检测装置 到了八十年代，随着生命科学、环境科学和材料科学的兴起，化学发光才被真正应用于分析化学并迅速得到了发展;化学发光(CL)的优点;化学发光(CL)的基本原理;一. 化学反应必须释放出足够的能量可以使某种反应产物或中间体到达激发态； 二. 反应历程必须有利于形成激发态产物； 三. 这种激发态物质必须具有一定的发光量子效率，或者能够将其能量转移给共存的某种荧光物质，产生光辐射。 ;; 化学发光(CL)的定量原理; 化学发光(CL)的常见反应体系; 复杂体系中低含量物质的检测——分析化学挑战之一 高选择性和高灵敏度的分析技术 化学发光是高灵敏分析技术，灵敏度可与质谱媲美 分布广泛、疗效确切的黄酮，易于发生氧化还原反应;;Chemiluminescence; 葛根素注射液中葛根素含量的测定;;中药沙棘制剂中的三种黄酮含量的测定;图2 槲皮素、山萘酚和异鼠李素标准化合物的DAD(a) 和CL(b)检测色谱图;图3 心达康胶囊(a)和沙棘颗粒(b)样品中 三种黄酮醇的CL检测色谱图 ;图4 二十种黄酮和酚类化合物的化学发光检测色谱图;黄酮具有抗氧化、抗癌、抑制脂肪酶等显著药理作用，受到国内外医药界的广泛重视，但其药动学研究资料的缺乏，制约了黄酮类新药的研发与体内作用机制研究 生物样品中痕量黄酮的高通量、高灵敏分析技术是研究药动学的基本前提 中药药动学研究所面临的生物样本具有药物含量低（样品中的中药成分浓度常在ng / mL水??或以下）、药物浓度变化范围大（需要测定的血药浓度范围为峰浓度 Cmax ―1/20 Cmax ）、干扰组分多且不确定、样品不易重复获得等特点 ;液相色谱–化学发光法测定大鼠血浆中山奈酚浓度及其药动学研究 ;研究背景;实验方法;HPLC-CL实验装置示意图;血浆样品的预处理方法;方法学考察;结 果;结 果;结 果;结 果;药动学研究 ;;首次成功将HPLC-CL联用技术应用于 中药药动学的研究;结 果;30;;;微透析技术 (microdialysis, MD);多个器官连续取样 与高灵敏度分析技术联用 活体内待测组分的实时、连续、检测 ;;脂溶性成分 二萜醌类;研究背景;研究背景;研究背景;研究背景;研究背景;30;研究内容;丹参六种水溶性成分结构;色谱与化学发光分析条件的优化; 实验一： 色谱柱：Shim-pack ODS, 250 × 4.6 mm I.D. 5 μm 柱温: 30°C 流速：1.0 mL· min-1 流动相：A：水（含0.1%磷酸，v/v） B：甲醇（含0.1%磷酸，v/v） 梯度洗脱：0–15 min，25–50% B；15–30 min，50% B 进样量：20 μL。 实验二： 流动相：0.1%磷酸–甲醇（92: 8，v/v），等度洗脱 其他条件同实验一 ;色谱与化学发光分析条件的优化;;.;微透析条件的优化;给药及采样;实验结果;;脑和血样品的专属性色谱图 ;丹参药动学研究;丹参药动学研究;表2 血液和脑中游离DSS及PA的药动学参数 （n = 6）;结 论;致 谢; Thank you for your attention