生物化学：03章酶化学1.pptVIP

活性部位仅占酶分子总体的相当小部分（1-2%） 某些酶活性部位的氨基酸残基 活性中心的两个功能部位 结合基团(binding group)：与底物相结合 —— 专一性 催化基团(catalytic group)：催化底物转变成物 —— 催化能力 2. 维持酶活性所必需的氨基酸残基——必需基团 在酶分子中有些基团并不位于活性中心，也不与底物直接作用，但它参与维持酶分子的空间构象，是酶表现活性所必需的部位。 底 物 活性中心以外的必需基团 结合基团 催化基团 活性中心 3. 酶活性中心存在的实验证明 （1） 切除法 小分子、结构已知酶 （2）X-射线衍射分析 对比图谱，直接观察 （3）化学修饰法（共价标记） 恰当化合物：特异结合酶活性部位氨基酸侧链 二异丙基氟磷酸（DIFP/DFP）对酶活性部位丝氨酸羟基的修饰 Ser195 胰凝乳蛋白酶 DFP不与Ser195以外的Ser结合 胰凝乳蛋白酶Ser195参与酶-底物共价复合物的形成 碘乙酰胺对巯基的修饰 （4）亲和标记法——底物结构类似物共价修饰剂（活性部位指示剂） 修饰剂特点： 可专一性引入酶活性部位 具活泼的化学基团——与酶共价结合 机制： 酶对底物的特殊亲和力 亲和标记试剂/活性部位指示剂 TPCK是胰凝乳蛋白酶的亲和试剂 胰凝乳蛋白酶底物 二、酶原及酶原激活 酶原 (zymogen) 有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，此前体物质称为酶原。 酶原激活 在一定条件下，酶原转化为有活性酶的过程。——调控机制，不可逆。 消化系统蛋白酶原的激活 ←胰蛋白酶抑制剂（胰腺） 赖 缬 天 天 天 天 甘 异 赖 缬 天 天 天 天 缬 组 丝 S S S S 46 183 甘 异 缬 组 丝 S S S S 肠激酶 胰蛋白酶 活性中心 胰蛋白酶原（trypsinogen）的激活 胃蛋白酶原（pepsinogen）的激活 酶 原 分子构象发生改变 形成或暴露出酶的活性中心 一个或几个特定的肽键断裂，水解掉一个或几个短肽 在特定条件下 酶原激活的机理 酶原激活的生理意义 避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。 有的酶原可以视为酶的储存形式。在需要时，酶原适时地转变成有活性的酶，发挥其催化作用。 * 食物消化;唾液淀粉酶 * 活化分子比一般分子高出的能量。 * 琥珀酸脱氢酶只催化产生延胡索酸,非顺丁烯二酸 * 当酶分子与底物分子接近时，酶蛋白受底物分子的诱导，其构象发生有利于底物结合的变化，酶与底物在此基础上互补楔合，进行反应。近年来X衍射分析的实验结果支持这一假说，证明了酶与底物结合时，确有显著的构象变化。因此人们认为这一假说比较满意地说明了酶的专一性。 * 金属酶(metalloenzyme) 金属离子与酶结合紧密，提取过程中不易丢失。 金属激活酶(metal-activated enzyme) 金属离子为酶的活性所必需，但与酶的结合不甚紧密。 * DFP早期曾作为有机磷杀虫剂之一，在第二次世界大战期间曾用作化学武器中的神经毒剂。能够与某些生物催化剂中酶蛋白上催化活性中心的丝氨酸残基上的羟基牢固地结合，抑制某些蛋白酶(如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶等)和酯酶。尤其中枢神经系统密切有关的乙酰胆碱酯酶，不但对DFP敏感，而且被DFP强烈地抑制。使体内的乙酰胆碱不能分解成乙酸和胆碱，故造成乙酰胆碱堆积，从而引起一系列神经中毒症状。一旦因口服DFP后出现昏迷、嗜睡等中毒症状时，即刻给患者灌服牛奶，同时促使其呕吐，并用碘解磷定静脉注射，重度患者与阿托品合用。 * 上述蛋白酶原均由胰腺产生 * 胃壁细胞分泌 目 录 目 录 第 三 章 酶化学 第一节通论 一、酶是生物催化剂 酶（enzyme）是由活细胞产生的，能在体内和体外起同样催化作用的一类具有活性中心和特殊构象的生物大分子。 目前将生物催化剂分为两类： 酶（enzyme）——体内代谢主要催化剂 核酶（ribozyme）——核酸底物 二、酶的催化特性 酶与一般催化剂的共同点 在反应前后没有质和量的变化； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点。 1. 催化效率高 酶的催化效率通常比非催化反应高108～1020倍， 比一般催化剂高107～1013倍。 1mol H2O2酶 能催化 5×106mol H2O2的分解 1mol Fe 3+ 只能催化6×10