脐带间充质干细胞对cia大鼠炎症因子干预概论.pptVIP

声明 1. 本 PPT 由《脐带间充质干细胞对 CIA 大鼠炎 症因子的干预》一文改编。 2. 本 PPT 所涉及资料和图象均仅用于学习参考， 不得用于商业目的或其它目的。 3. 若使用本 PPT 所涉及资料和图象，应向相关 拥有知识产权使用权的网站购买，并标明 出处。 脐带间充质干细胞对 CIA 大鼠炎症因子的干预 演讲者： blueappleboy 实验 背景 目的 方法 正常组 模型组 Uc-MSC 组 脐带间充质干细胞对 CIA 大鼠炎症因 子的干预 背景：脐带间充质干细胞可表达多种胚胎干细胞的 特有分子标志，具有分化潜力大、增殖能力 强、免疫原性低等特征。 目的：观察脐带间充质干细胞对类风湿性关节炎免 疫炎性的病理过程的干预作用。 方法：实验分为 3 组，建立Ⅱ型胶原诱导的类风湿 性关节炎模型大鼠，脐带间充质干细胞组于 造模后第 4 周经大鼠尾静脉注射脐带间充质干 细胞，模型组注射生理盐水。 引言 类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis ， RA) 时白细 胞介素 1 、白细胞介素 6 、白细胞介素 18 、肿瘤坏死因 子 a(tumor necrosis factor-a ， TNF-a) 等炎症因子相 互作用形成了一个细胞因子网络。其主要功能是促进 B 细胞增殖与分化，促进类风湿因子的合成，促进肝 细胞合成急性期蛋白，从而增强炎症过程，加重关节 病变。它们亦可直接损伤内皮细胞，激活血小板，影 响纤溶系统等，同时诱导内皮细胞、白细胞等合成释 放各种炎症递质、黏附分子扩大炎症反应，加重免疫 炎性血管和关节损伤，促进血液呈高凝性改变。 脐带间充质干细胞 (umbilical cord mesenchymal stem cells ， Uc-MSC) 表达多种胚胎干细胞的特有分 子标志，具有分化潜力大、增殖能力强、免疫原性 低、取材方便、不受道德伦理限制等特征受到临床 关注。课题以 CIA 大鼠为观察对象，探讨 RA 炎症黏 附因子水平变化及 Uc-MSC 对其的干预作用。 材料和方法 设计：随机对照动物实验。 时间及地点：实验于 2009-09/2010-06 在扬州 大学医学院完成。 材料：雌性近交系 SD 大鼠 30 只，清洁级， 4~6 周龄，体质量为 (162 ± 20) g ，购于南京 医 科大学实验动物中心。 主要试剂 试剂及仪器 来源 鸡 Ⅱ 型胶原 Sigma 公司 冰乙酸 ( 分析纯 ) 中国恒利试剂厂 L-DMEM 、胎牛血清、胰蛋白酶 美国 Gibco 公司 大鼠白细胞介素 1 、大鼠白细胞 美国 RD 公司 介素 6 、大鼠白细胞介素 18 ELISA 试剂盒、大鼠 TNF-a ELISA 试剂盒、大鼠血管细胞 黏附分子 1(vascular cell adhesion molecule-1 ， VCAM-1) ELISA 试剂盒、 FITC Mouse Anti-Rat CD11b 、 FITC Mouse lgA 实验方法 Uc-MSC 的制备：将人的脐带剪成组织块后贴 壁培养 72 h ，去除未消化的组织块，将原代脐 带间充质干细胞用胰蛋白酶消化后加入含有体 积分数 10% 胎牛血清的 L-DMEM 培养基终止消 化，反复吹打，移入离心管中离心 10 min 后， 去掉上清液，加入培养基后吹打，移入培养瓶 中， 37 ℃ 、体积分数 5%CO 2 培养箱中培养， 至第 3 代消化、离心后用生理盐水将 Uc-MSC 细 胞浓度调至 2 × 10 9 L-1 ， 4 ℃ 保存备用。 CIA 大鼠模型建立：雌性近交系 SD 大鼠，随机分为正常组 ( 见