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盐析鸡蛋清制取卵白蛋白课外活动实验 新课程鼓励师生充分利用生活中常见物品，设计现象明显、 富有特色的实践活动和定量实验 [1] 。鸡蛋是生活中的重要食材， 蛋清中蛋白可用来制作泡沫干燥垫、 提取分离抗菌肽、 合成哮喘 特异性过敏原等[2?4],利用盐析法分离蛋清中蛋白是一项联系 生产、生活与化学，激发师生创新思维的优质定性探究实验。虽 然目前已有的相关实验引导学生演示蛋清杂蛋白盐析及复原过 程，但却未细化到盐析制取某一具体蛋白并计算其产率， 内容较 单薄陈旧，没能利用新科技、动态辅助知识内化，大多数学生经 过实验仅仅像“凑了个热闹”。 数字化定量实验作为实验教学的 重要组成部分，有利于学生科学探究素养的深层培养 [5， 6]，而 盐析鸡蛋清制卵白蛋白实验现象明显， 所需盐溶液浓度也是最高 的，易于在蛋清中提取， 故而设计蛋清盐析法制卵白蛋白的定量 实验有其必要性与可行性。 通常用来测量浓度的手持技术因其设备昂贵， 没能在中学实 验中大量普及， 为方便实验操作， 本实验在采用硫酸铵对蛋清中 的卵白蛋白进行盐析分离与复原演示基础上， 以普及度较高的智 能手机为测量仪器， 配合相关软件测定盐析法提取的鸡蛋清卵白 蛋白产率，为高中课外探究实验开发提供案例。 1 实验部分 仪器与试剂 新鲜鸡蛋，购自超市；365nm紫外手电，购自超市；面粉筛 网，购自超市；注射器，购自药店；生理盐水，购自药店；双层 灭菌纱布，质量密度100g/m2，衡阳绝缘材料总厂生产，购自药 店；硫酸铵化肥（》99.5%），衢州市宏捷化肥 XX公司生产，平 时收集；牛血清白蛋白（》98.0%,分析纯）（BSA，上海晶纯 生化科技XX公司生产，学校提供；硬纸板，平时收集；比色皿， 网上购买；智能手机（本案例选用三星 GalaxyS4 ）;光强测量 App,网上下载［本案例使用安卓系统智能手机，测量 App选用 Luxmeter with graph ，下?d 网址 https : // amazon/dp/b00mdub0ze/，安装后在手机上显示图标如图 1 （1） 所示。若使用 iPhone 手机进行实验,可下载 Lux light meter free ,下载网址 https : //itunes.apple/us/app/lux-light-meter-free/ id1171685960 ? Mt=8,安装后在手机上显示图标如图 1 （2）所 示］。 实验方法 教师实验所需药品制备 标准白蛋白溶液：称取 50mg牛血清白蛋白置于烧杯中，并 用少量生理盐水溶解，而后转移至 50mL容量瓶以生理盐水稀释 至刻度制成溶液。之后分别用生理盐水稀释得到 0.2mg/mL、 0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL 的 BSA标准溶液。 测定原理 根据朗伯 - 比尔定律可知，以同一光源照射不同浓度的卵白 蛋白溶液，溶液透过光的光强与卵白蛋白浓度成一定比例关系 ［7 ，8］。 实验测量装置制作 课外实验器材要求制作简单，性能可靠，易于操作，廉价易 得［9］。为了避免其他光线干扰，本实验中我们以 365nm紫外手 电为检测光源， 以不透明硬纸板按比色皿大小制作长方体带盖纸 盒，并按图 2（1）所示位置剪两个圆孔，制成如图 2（ 2）所示 比色皿暗盒（光源入射口与其背面孔位对齐），比色皿暗盒背部 圆孔与手机光线传感器元件紧密贴合，构成手机光线传感器 - 比 色皿 -光源间密闭不透光空间。这样一来数据测量不再需要昂贵 的滤光片。 实验步骤 教师实验 （1） 打开光线测量软件。 （2） 依次测量生理盐水 0.2mg/mL、0.4mg/mL、 0.6mg/mL、 0.8mg/mL、1.0mg/mL BSA标准溶液透光能力。待测液加入比色 皿后，将比色皿装于自制不透光比色皿暗盒， 比色皿暗盒背部圆 孔与手机光线传感器元件紧密贴合（如图 3 所示），打开紫外手 电贴合槽前侧圆孔照明， 利用软件测量其透光能力， 记录稳定后 数据，每次更换待测液时选择“=”，恢复实验时点击“▲”。 测量界面如图 4所示，测量结果如图 5所示，回归曲线： y二0.62486X+ 3.9087 , R2=0.9947，相关性良好。 学生实验 （1）用双层灭菌纱布过滤一个鸡蛋的蛋清得到其水样成分 后，用30mL注射器测量水样成分体积记录数据 V,家用食品秤 测量质量记录数据 m用2.5mL注射器吸取水样成分2.5mL置于 小烧杯，加入生理盐水 2.5mL，充分搅拌（搅拌剧烈程度以不起 泡为准），得到稀释液 。 （ 2）为去除蛋清中除卵白蛋白外其他可溶性蛋白，利用不 同蛋白盐析浓度不同的原理， 我们通过注射器向稀释液中逐滴加 入饱和硫酸铵化肥溶液 5mL （边加边搅拌，注意不要使鸡蛋清