天然抗菌肽的改造.docxVIP

天然抗菌肽的改造 尽管抗菌肽具有众多优点， 然而要将抗菌肽应用于生产实践 还面临着诸多挑战，比如溶血活性、体内活性不高等问题。为了 克服上述难题， 国内外学者做了大量细致而深入的研究。 在不断 发现新抗菌的同时， 研究者们又对先前发现的抗菌肽进行分子设 计和结构改造，产生了具有优良特性的改良型抗菌肽。 改变氨基酸序列 替换抗菌肽的部分氨基酸，不仅可以提高抗菌肽抗菌活性， 还能增加抗菌肽的经济实用性，减少其免疫原性。 Kai Hilpert 等［1］ 通过以纤维素为载体合成多肽的方法， 将具有 12 个氨基酸 序列的抗菌肽Bac2A。并通过改变其氨基酸序列，或加上硫基等， 降低了抗菌肽的MIC和IC50。Hicks等［2］合成了一些肽链，这 些肽链里含有由两种不常见的合成氨基酸 - 四氢异喹啉羧酸 （Tic ）和八氢吲哚-2-羧酸（Oic ）组成的二肽单元。通过筛选 这些肽链，发现了两种肽链具有对多重耐药菌较强的杀菌作用。 研究发现， 这些肽段的构象具有很强的弹性， 能与细菌的细胞膜 的不同组成部分相结合，发挥较强的杀菌功效。利用MTT法和测 定细胞完整性来评估这两种抗菌肽的安全性，发现毒性较低。 变换辅助基团 抗菌肽的生物活性不仅仅与氨基酸序列关系密切， 还与其辅 助基团的特性息息相关。 Albada 等［3］ 利用固相合成法合成了一 些富含精氨酸和色氨酸的多肽， 发现具有抗菌活性。 后在这些肽 链的N端加上有机金属FcCO后发现能提高抗菌活性，将FcCO换 成RcCC发现杀菌活性得到进一步增强，其表现出的溶血反应也 有所降低。应用人体的三类肿瘤细胞系检测其 IC50，发现IC50 远远高于治疗浓度， 安全性较高。 研究者发现抗菌肽的某些基团 改变后， 会改变肽链的二级结构， 也能相应改变抗菌肽的一些生 物特性。 Kim 等[4] 将抗菌肽去掉部分酰胺键，相应的减少了抗 菌肽空间结构的a螺旋的数量，溶血反应出现的几率降低。 Xi 等应用基因工程在大肠杆菌合成 LHP7基因，在酵母菌 P.pastoris X-33 表达的产物对于葡萄球菌属以及链球菌菌属有 较强的杀菌活性。LHP7为在菌丝霉素和LH28的基础上合成的含 有83个氨基酸的肽链，含有 GPDGSGPDESGP连E接体。实验证 实，连接体结构具有很强的可塑性，不影响肽段本身功能。且连 接体可以通过降低肽段的电荷数来降低其不稳定指数。 LHP7增 加了菌丝霉素的抗菌活性，降低了 LH28的毒性。LHP7在远大于 MIC、MBC的浓度时才表现出溶血作用，不失为治疗革兰氏阳性 菌感染的潜力药物 [5] 。 改变其他途径调节抗菌肽 除了对抗菌肽本身进行改造， 学者也致力于通过研究抗菌肽 的其他调控机制来提高抗菌肽的生物活性，例如调节 Toll 样受 体（TLR来提高抗菌肽杀菌活性。研究发现人防御肽（ HDPS 除了具有间接杀菌作用外，还具有中和内毒素，降低炎症反应， 促进伤口愈合等优势 [6] 。数据表明，一线药物虽能控制疟疾， 却无法控制因炎症而导致的后遗症，如癫痫、昏迷等。 Achtman 等[7] 发现将固有防卫调节分子如 IDR-1018 与一线药物一起应 用于疟疾的治疗，可以大大降低癫痫、昏迷等副作用的发生。 IDR-1018主要影响CD14阳性单核细胞的活化信号通路，在转录 水平发挥作用，以降低炎症因子如 TNF-a、IFN- 丫等的分泌以及 信号传导，降低脑部后遗症的发生率。 Wieczorek 等[8] 又通过 定量构效关系（QSAR等方法研究IDR-1018的空间构象与免疫 调节和杀菌活性的关系。 这种方法可以用来预测肽链序列中氨基 酸的特性。 将预测到的具有价值的氨基酸应用于肽链的合成， 使 合成的肽链具有更强的杀菌和免疫调节的生物活性， 同时也应致 力于减少副作用的发生。 结语 在耐药菌层出不穷的今天， 抗菌肽作为极其具有潜力的替代 品应用于临床，有着抗菌活性强，抗菌谱广的优势。抗菌肽的成 功运用也给食品加工、 畜牧养殖业、 农业等领域带来不可思议的 变化。然而，耐药性、安全性、生产来源等问题行成为了抗菌肽 在实际生产的发展及应用。 利用分子设计和结构改良对抗菌肽进 行改造， 给开发安全高效的抗菌肽提供了有效途径。 我们期待在 不久的将来，抗菌肽能够开启抗生菌药物使用新纪元。