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大肠杆菌生物制品使用现状 目前常见的主要有仔猪、禽、羊、兔的各类大肠杆菌疫苗。 各种动物大肠杆菌疫苗 仔猪大肠杆菌疫苗 禽大肠杆菌病疫苗 兔大肠杆菌病疫苗 羊大肠杆菌病疫苗 等等 仔猪常用疫苗 仔猪疫苗多为 仔猪大肠杆菌病三价灭活疫苗 仔猪大肠杆菌疫苗 K88 — ST1 — LTB 三价灭活疫苗 常用： 仔猪大肠杆菌基因工程 仔猪大肠杆菌病 K88-K99-987P-F41 四价亚单位疫苗 仔猪大肠杆菌病三价蜂胶灭活疫苗（ 主 ） 1. 例如：仔猪大肠杆菌基因工程 K88 — ST1 — LTB 三价灭活疫苗，由辽宁省益康生物制品厂生产。 2. 接种对象：仔猪 3. 使用方法：颈侧肌肉注射，每次间隔 7 天 , 三次免疫量分别为 5mL 、１ 0mL 、 20mL ；第 2 次和第 3 次免疫应分点注射。 4. 效果： 禽大肠杆菌病疫苗 （一） 灭活疫苗 ： 1 、灭活蜂胶苗 2 、灭活油乳剂苗 3 、灭活铝胶苗 亚单位疫苗 1 、菌毛亚单位疫苗 2 、荚膜亚单位疫苗 弱毒疫苗 O2(NorrChls) 、 O78(ChlsNorr) 单价弱毒苗、 （二） （三） 以鸡大肠杆菌病灭活疫苗制备为例： 1 、菌种 病原性大肠杆菌 EC24 、 EC30 、 EC45 、 EC50 、 EC44 麦康凯氏培养基培养 2 、制造要点 (1) 、种子繁殖： 马丁肉汤培养 - 划线接种麦康凯氏培养基培养 - 接种马丁琼脂斜面培养 - 作为一级种子 - 取一级种 子接种马丁肉汤培养 - 得到二级种子。 (2) 、菌液制备：用玻璃瓶或培养罐通气培养，按容积装入 70% 培养基及花生油消泡剂。 (3) 、配苗与封装： 配苗：每 5 份菌液加 1 份氢氧化铝胶，同时按总量的 0.005% 加硫柳汞，充分震荡， 2 ～ 8 ℃静置， 抽弃上清液浓缩成全量的 60% 。 封装：检验合格，混合分装 3 、质量标准 (1) 、安全检验 (2) 、效力检验 4 、保存与使用 保存： 2 ～ 8 ℃保存，为期 1a 。 使用：颈背侧皮下注射 0.5ml,1 月龄鸡 接种对象： 1 月龄鸡以上的鸡免疫期为 4 个月 附： 禽大肠杆菌病 禽大肠杆菌病 是由大肠埃希氏菌的 某 些血清型 所引起的一类疾病的 总称 。 包 括 心包炎、脐炎、卵巢炎、输卵管炎、 肠炎或慢性肿瘤样肉芽肿等。 鸡大肠杆菌病 主要病型和特征： 胚胎和幼稚死亡、败血症、气囊炎、包括心包炎、脐炎、卵巢炎、输 卵管炎、肠炎或慢性肿瘤样肉芽肿 等。 病原： 肠杆菌 SEPEC 中 O 1 、 O 2 、 O 36 、 O 78 等血型 免疫： SEPEC 的毒力因子为 F11 和 F1 黏附因子 - 黏附因子具 有良好的抗原性，刺激机体产生特异性抗体。 疫苗：目前国内外对鸡大肠杆菌病的免疫预防，主要基于以 黏附素免疫 为基础的含 单价或多价菌毛抗原的灭火菌苗、菌毛亚单位疫苗 等。 主要症状 鸽直肠黏膜充血、出血 脐孔周围皮肤红肿（鸭） 严重的纤维素性心包炎 小鸡输卵管膨大，内有 灰白色干酪样渗出物 卵巢感染发炎， 卵泡变形（鸭） 【防治要点】 大肠杆菌生物制品 与人有关如： 国外人类腹泻的 ETEC 基因工程疫苗的研究进展—以肠毒素疫苗为例 1984 年，美国杜兰大学医学中心试验得到 菌株 SE12 。小鼠和豚鼠试验表明， SE12 菌株口服 时是安全的，并能产生明显的 抗毒素免疫反应 。重组菌株可以作为 预防伤寒和霍乱 - 大肠 杆菌相关腹泻的二价口服活疫苗 。 1994 年，英国坎特伯雷肯特大学将含 LTB 基因的重组质粒 转化海产弧菌， LTB 表位融合 蛋白在海产弧菌中成功分泌表达，该方法可能会广泛应用于 LTB 疫苗的制备 2001 年，巴西圣保罗大学将编码 ETEC 鞭毛蛋白和热稳定肠毒素的基因 进行连接，插入 载体 pCDNA3 中，构建质粒 pCDNA3 ／ FLA-STmt ，转化至减毒沙门菌 SL3261 中，制成活载 体疫苗。 2005 年，伊朗塔比阿特莫达勒斯大学构建了 LTB 蛋白的 酵母表达体系，构建 pLTB83 质粒，将重组质粒转化至酿酒酵母菌，重组酵母菌 表达 LTB 的新型疫苗 。 2006 年，巴西圣保罗大学将枯草