结核病实验室检查的临床意义课件.pptVIP

方法学的优点 ? 检测特异性的提高 – 帮助临床区分卡介苗接种和环境分枝杆菌感染引起的 “假阳性”，避免了临床的无效用药 ? 检测灵敏度的提高 – 有利于临床对结核病的早发现、早治疗，避免了疾病的 传播与扩散 ? 快速 – 48 小时出结果 32 方法学的局限 ? 不能区分活动性 TB 与潜伏感染 ? 不能够提示临床患者的病变部位，需要结合临 床的判断 ? 目前还不能够根据斑点数量的多少来判断患者 是活动性结核病或是潜伏感染者 ? 不适合用于结核病患者治疗的疗效监测 ? 检测收费高（ 600-700 元 / 次） 33 体外 r- 干扰素释放试验 IGRA 在评价抗结核治疗中的作用是有限的 活动性结核病通过有效的抗结核治疗后，结 核杆菌载量下降，效应 T 细胞数量会随之减少，所 以理论上 IGRA 结果应从阳性转变为阴性，但临床 实践中发现 IGRA 结果转阴率非常低。 2012 年发表 的一篇 meta 分析中指出， T-SPOT.TB 在结核病患者 抗结核治疗后转阴率为 5.71%-13.93% ，说明 IGRA 在评价抗结核治疗方面作用是有限的。 Chiappini E, Fossi F, Bonsignori F, et al. Utility of interferon- γ release assay results to monitor anti-tubercular treatment in adults and children. Clin Ther, 2012, 34: 1041-1048. 34 涂片染色镜检 细菌学检查 分枝杆菌分离培养 分支杆菌药敏试验 分枝杆菌菌种鉴定 结核病 体液免疫学诊断 免疫学检查 细胞免疫学诊断 实验室检查 分子生物学检查 聚合酶链反应（ PCR ） DNA 测序 DNA 探针技术 基因芯片技术 35 分子生物学检测方法 ? 近年来核酸扩增技术和杂交分析技术的发 展，为分枝杆菌的检测、鉴定和药敏实验 提供了极大的方便，可将诊断时间从几周 降低到几天甚至是几个小时。研究、应用 报道较多的结核病基因诊断技术主要包括 聚合酶链反应 (PCR) 、核酸探针杂交、 DNA 序列测定、基因芯片、基因分型等。 36 实时荧光 PCR 技术 ? 本实验室所使用的结核分枝杆菌核酸检测 试剂盒（荧光 PCR 法）采用单管单人份的分 装技术，操作过程非常简便；并引入荧光 检测技术，简化了检测步骤，并且整个扩 增及扩增后检测都无需打开扩增管盖，从 根本上克服了 PCR 遗留污染。荧光探针 PCR 检测技术综合了 PCR 扩增的高敏感性、探针 杂交的高特异性及荧光能量转移的实时跟 踪特性，使检测的准确性大大提高，并可 充分保证检测的稳定性及重复性。 37 结核杆菌 PCR 检测的临床意义 ? 1. 在痰菌阴性结核快速诊断有重要临床应用 价值。 ? 在临床工作中，痰菌阴性，经临床综合分析后诊 断为肺结核的患者，约占肺结核患者的 60%-70% 。 有报道指出痰菌阴性的肺结核患者，如果未经抗 结核治疗，经过 1-3 年的随访，将有 40%-60% 的患 者发展为菌阳甚至更典型的肺结核。所以获得病 原学的诊断至关重要 38 结核杆菌 PCR 检测的临床意义 ? 2012 年发表在中国防痨杂志中的一篇文章 的研究指出在 476 例菌阴肺结核病患者中， PCR 法检出 116 例阳性，检测的灵敏度为 24.4% ? 而菌阳肺结核患者的检测灵敏度为 97.0% 39 结核杆菌 PCR 检测的临床意义 ? 2 、 PCR 法可以作为临床痰涂片和痰培养的补充， 为临床诊断和治疗提供帮助 ? 涂片阳性并不能区分是结核分枝杆菌还是非结 核分枝杆菌，这两者的治疗是有很大的差异的， NTM 对于常用的抗结核药经常都是无效的，所 以对于涂片阳性的标本，很有必要在在做 MTB- DNA 的检测，进一步确认是否是真的 MTB 的感 染。 40 结核杆菌 PCR 检测的临床意义 ? 3. 可作为结核性关节炎和泌尿系统结核早期诊断的一个可 靠指标。 ? 118 例疑似结核病患者 , 其中关节炎患者 52 例 , 泌尿系感染患者 66 例 , 应用 FQ-PCR 技术分别检测患者关节腔积液和尿液中的 TB- DNA , 并与抗酸染色法的检出率比较。 ? 结果 52 例关节炎患者中 , 确诊结核性关节炎患者 36 例 , TB-DNA 阳性 2