遗传代谢性疾病的基因诊断PPT课件.pptVIP

目录 Contents 基因诊断技术 遗传代谢性疾病的基因诊断 概述 * 概述 * 概述 1.1 物质代谢与代谢性疾病 1.2 代谢性疾病的分类与诊断 1.3 基因诊断的概念与特点 * 概述：物质代谢与代谢性疾病 物质代谢：物质在生物体内的消化、吸收、运转、分解等与生理有关的化学过程称为物质代谢。 同化作用：机体从外界摄取营养物质，转化为机体的组织成分的过程称为同化作用。 异化作用：机体本身的物质分解成代谢产物，排出体外的过程称为异化作用。 合成代谢：小分子物质合成大分子物质的反应称为合成代谢。 分解代谢：由大分子物质分解成小分子物质的反应称分解代谢。 * 概述：物质代谢与代谢性疾病 遗传代谢性疾病：是指由于基因突变引起酶缺陷、细胞膜功能异常或受体缺陷，从而导致机体生化代谢紊乱，造成中间或旁路代谢产物蓄积，或终末代谢产物缺乏，引起一系列临床症状的一组疾病。 代谢性疾病：因物质代谢过程紊乱引起的疾病，多为酶或蛋白异常所致。根据代谢性疾病的病因，可将其分为原发性与继发性。 * 概述：代谢性疾病的分类与诊断 代谢性疾病的分类 原发性代谢疾病：又称先天性代谢疾病。是指当编码物质代谢所需酶或蛋白的基于发生突变、不能合成或合成了无活性的产物时，就会导致有关代谢途径不能正常运转，造成具有不同临床表现的各种代谢性疾病。 继发性代谢疾病：由其他原发性疾病导致的代谢性疾病，如糖尿病导致的继发性高脂血症。 * 概述：代谢性疾病的分类与诊断 过去：主要依靠物质代谢相关的各种酶的生物化学方面的诊断。 现在：生化诊断+基因诊断 代谢性疾病的诊断手段 * 概述：基因诊断的概念与特点 基因诊断 基因诊断就是利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病做出诊断的方法。 特点 针对性强 特异性高 灵敏度高 适用性强 诊断范围广 * 基因诊断技术 * 基因诊断技术 2.1 DNA测序技术 2.2 聚合酶链反应技术 2.3 毛细管电泳技术 2.4 基因芯片技术 * 基因诊断技术：DNA测序技术 DNA测序 所有的生物基因数据 均来自DNA测序 特点 稳定简便 自动化程度高 数据准确可靠 公认为国际金标准 * 基因诊断技术：DNA测序技术 两种常用DNA测序方法 焦磷酸测序技术:引物与模板DNA退火后，在DNA聚合酶、ATP硫酸化酶和西安磷酸腺苷双磷酸酶等4种酶的协同作用下，将每一个dNTP的聚合与一次荧光信号的释放偶联起来，通过检测荧光的释放和强度，以荧光信号的形式实时记录模板DNA的核苷酸序列。 双脱氧链终止法:测序基础是以ddNTP为测序反应的链终止剂,掺入到延伸链中的ddNTP可阻止后续dNTP的掺入。 * 基因诊断技术：聚合酶链式反应技术 聚合酶链式反应(PCR)： PCR是体外酶促合成特异DNA片段的方法。 四种主要成分： 模板DNA、引物、DNA聚合酶和dNTP。 三个反复步骤： 高温变性、低温退火、适温延伸。 * 基因诊断技术：毛细管电泳技术 毛细管电泳指以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据式样中各组分间淌度和分配行为上的差异来实现分离的一类分离技术。 基本原理是根据在电场作用下离子迁移的速度不同而对组分进行分离和分析。 毛细管电泳技术 * 基因诊断技术：基因芯片技术 基因芯片技术就是将大量特定的靶基因片段或核苷酸片段作为探针有序和高密度地排列固定于玻璃和硅等固相载体上，然后检测与待测的不同荧光标记样品基因按碱基配对的原理进行杂交； 通过荧光共聚焦系统检测探针分子的杂交信号强度，经计算机分析处理数据资料，获取不同样本分子的数量和大量生物信息，从而可对基因序列及功能进行大规模和高通量的研究。 基因芯片技术 * 遗传代谢性疾病 的基因诊断 * 遗传代谢性疾病的基因诊断 3.1 遗传代谢性疾病的特征及基因诊断策略 3.2 苯丙酮酸尿症(PKU) 3.3 同型胱氨酸尿症(HCU) 3.4 络氨酸血症 3.5 其他遗传代谢性疾病 * 遗传代谢性疾病的基因诊断：遗传代谢性病征及诊断策略 遗传代谢性疾病是指由于基因突变导致酶的质和量的改变，从而所催化的酶促反应发生变化而引起的一系列疾病 病理生理改变特征 代谢途径的某些终末产物缺乏 中间或旁路代谢产物大量蓄积 由于代谢途径受阻而导致对肝、脑、肌肉等组织能量供应不足 * 遗传代谢性疾病的基因诊断：遗传代谢性病征及诊断策略 发病特点 父母双方或者某一方携带着致病基因 多在新生儿期、幼儿或儿童期发病，有些虽然在成人期发病，但在儿童期已有潜在病变。 临床表现无特异性，多为胃肠道、呼吸系统、神经系统症状、代谢性酸中毒。 家族史中往往有同样病情的先证者存在，而且往往因饮食和应激等因素发病 * 遗