牛肉膏蛋白胨培养基配制和灭菌.pptVIP

1）用之前检查水位及水质。若水质不好，需换水 2）放置灭菌物品，勿过满；瓶子灭菌，瓶盖拧松 3）盖上锅盖，相对的两个螺帽一起拧 4）启动加热，同时打开放气阀；检查安全阀是否关上。调整温度时间121℃ 15min。 5）待排气阀冒出大量热气并持续约2~5min后排尽冷空气后，再将其关闭； 6）灭菌结束，待压力下降至0，可打开放气阀，之后开盖。注意防止烫伤 7）固体物品可进行干燥；液体物品冷却后拧紧。尽量避免二次污染。 * 5.鼓风干燥箱 * 6.超净工作台 * 每次使用前，先用75%酒精（或新洁尔灭）擦洗台面，并提前用紫外线灭菌灯照射15~30min处理净化工作区内积存的微生物；关闭灭菌灯后应启动风机使之运转2min后再进行培养操作；工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流流型不受干扰；使用完毕应及时清理工作台面上的物品并用酒精擦拭台面使之始终保持洁净。 * 7.微量移液器的使用 * 今天的工作： 1.固体物品的灭菌 2.配制培养基并进行灭菌 3.学习倒平板 4.学习斜面培养基制作 5.超净台的准备 6.划线接种 7.灭菌效果检查 * 开始实验 1.固体物品： 1）平皿（6只/组） 2）试管与棉塞/塑料封口（6只/组）的包扎 3）灭菌蓝色、黄色和白色枪头 将以上物品放入灭菌锅中进行灭菌121℃ 20min * 2.培养基： 培养基分 液体、半固体和固体 3种 液体培养基有各种肉汤培养基，主要用于细菌扩大培养； 半固体培养基含0.4%琼脂，主要用于保存细菌 固体培养基含15%~20%琼脂，主要用于分离细菌 * 牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 15-20g pH 7.4-7.6，加水至1 000mL；若需分装，需先融化，摇匀后分 于121℃高压灭菌15~20min备用 用途：普通细菌常用的培养基 （1）固体培养基配置 * 请大家配制： 请大家查看“营养琼脂”的成分与配制说明，每组配置牛肉膏蛋白胨固体培养基150mL于锥形瓶中 请大家先写出1L的配方，然后再写出150mL的配方 * 配制完毕，将配制好的培养基装入锥形瓶内，瓶口塞上棉塞，用牛皮纸/报纸包扎瓶口，标注好组别，进行高温高压蒸汽灭菌 * （2）液体培养基 为固体培养基中不含琼脂 牛肉膏蛋白胨培养液 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g pH 7.4-7.6，加水至1 000mL 于121℃高压灭菌15~20min备用 用途：普通细菌常用的培养基 * 请大家查询LB培养基配方 每组配置LB液体培养基50mL于锥形瓶中，包扎好瓶口（纱布+牛皮纸/报纸）后灭菌 请大家先写出1L的配方，然后再写出50mL的配方 * LOGO 牛肉膏蛋白胨培养基配制和灭菌 一、复习 二、实验：配培养基与灭菌 三、斜面的划线培养 四、倒平板的操作 五、平板划线培养 * 一、复习 * * 《微生物培养与检验》主要课程内容 1.微生物营养需求 2.微生物形态 3.微生物纯化、分离 4.微生物培养、筛选与保存 5.微生物检验 * 课程内容 微生物吃什么？ 1 微生物长的什么样？ 2 如何得到微生物？ 3 如何保存微生物？ 4 我很爱吃熟食（猪头肉），但是听说熟食微生物超标，这是怎么检测的？ 5 * 规则： 1.上课不迟到：第1、5节课，提前10min到教室 2.下课前，自己的实验物品归类，该清洗的清洗，该收拾的收拾 3.值日生负责擦黑板、扫地、擦桌；为大家做好服务工作 4.上课时间请不要玩手机 * 安全操作与标准操作 * （一）微生物培养基的制备 （二）微生物的消毒灭菌 （三）认识微生物培养所需的仪器设备 微生物吃什么？ 1 * （一）微生物培养基的制备 培养基：是人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养物质。 满足微生物生长发育的水分、C，N，生长因子，P，S，Na，Ca等 适宜的酸碱度、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位，合适的渗透压 * 根据物理状态划分 培养基分 液体、半固体和固体 3种 液体培养基有各种肉汤培养基，主要用于细菌扩大培养； 半固体培养基含0.4%琼脂，主要用于保存细菌 固体培养基含15%~20%琼脂，主要用于分离细菌 * 培养基的配制原则 1.选择适宜的营养物质 实验室中常用： 不同微生物所需培养基各不同 牛肉膏蛋白胨培养基 细菌 高氏一号 放线菌 麦芽汁培养基 酵母菌 察氏培养基 霉菌 * 2.营养物质的浓度及配比合适 3.控制pH条件 细菌和放线菌：pH7.0~7.5