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不同金属离子对酶活性的影响 金属离子对酶活性的影响 目标：1。了解金属离子对酶活性的影响； 2、掌握不同金属离子对酶活性作用结果的测量方 酸性磷酸酶广泛分布于动植物、植物种子、霉菌、肝脏和人类前列腺。它在核苷酸、磷脂和磷脂的代谢、骨的形成和磷酸盐的利用中起着重要作用。磷酸酶是一种能使相应底物去磷酸化的酶。通过水解磷酸单酯，去除底物分子上的磷酸基团，生成磷酸离子和游离羟基。磷酸酶的作用与激酶相反。激酶是一种磷酸化酶，可以利用能量分子，如ATP，将磷酸基团添加到相应的底物分子中。 本实验选用绿豆芽作材料，从中提取酸性磷酸酯酶。以人工合成的对硝基苯磷酸酯（npp）作底物，水解产生对硝基苯酚和磷酸。在碱性溶液中，对硝基酚盐离子在405nm处光吸收强烈，而底物没有这种特性。凡是能提高酶活性的物质统称为酶的激活剂。无机离子和一些金属离子对酶有激活作用，可以作为酶的激活剂。其中钾离子是酸性磷酸酯酶的一种激活剂，它在酶与底物之间起了桥梁作用，形成了酶—金属离子—底物三元复合物，从而更有利于底物与酶的活性中心部位的结合。而氯离子和钠离子对酸性磷酸酯酶的活性 一些重金属离子，如铜离子，抑制酶的活性。 1、仪器：恒温水浴箱、试管架、试管、分光光度计、 反应杯、吸头、滴管、移液枪、移液管 2、试剂：1.2mmol/lnpp100ml、0.3mol/lnaoh250ml、酸性磷酸酯酶、ph5.0的柠檬酸缓冲液1000ml、2mmol/lfeso4、2mmol/lcuso4、mncl22mmol/l、mgso42mmol/l、kcl2mmol/ledta、实验步骤： fesocusomnclmgso 调零401422344空白edtakcl对照567npp （ML）11111酶溶液 l）1111111111111111 l） 注：反应均在37度水浴箱中进行，0号管先加入1.0mlnpp后保温15分钟，然后加入naoh3ml，混匀后再加酶液1ml，在波长405nm处观察od值，以0号管调零实验结果 fesocusomnclmgso （abs）0调零401422344空白edtakcl对照5670.680.301.260.350.340.340.284927124由实验数据得到的图标如下： 以各金属离子为横坐标和a405纵坐标，绘制不同金属离子与酶活性的曲线，观察金属离子与酶活性的关系，分析哪些是酶活性激活剂和酶活性抑制剂。 结果分析：通过实验组与对照组的od值对比可知，保证在适宜的温度、ph等外界条件下，再加入1ml2mmol/l浓度的各种金属离子溶液，对酸性磷酸酯酶的活力均有激活作用。它们对酸性磷酸酯酶激活作用的强度由大到小依次为：mncl2、feso4、mgso4kcl、edta、cuso4。可以看出，重金属对这种酶的激活作用比较强。