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参苓白术颗粒中人参皂苷的含量测定方案 一、设计背景 随着医药行业的不断发展，更多的研究者在研究中医药剂中的含量时，选择利用实验及结合医学要点分析其特点及功效，其中参苓白术颗粒属中药类也有“参苓白术丸”，具有健脾胃祛湿的作用，临床主要用于调节肠道运动，增加拮抗氯化钡和毛果芸香碱引起的肠管收缩，能增强肠管对水和氯离子的吸收。改善代谢，具有治疗慢性胃炎、慢性结肠炎以及十二指肠溃疡等疾病，还可以治疗尿酸、尿中肌酐以及尿素氮的改善。参苓白术颗粒是呈现淡黄棕色至棕褐色的颗粒，味道甜带有微苦，因此制剂颗粒以糖衣包裹可去除苦味。参苓白术颗粒的药理情况，它属于抑制类药物，属中药制剂。根据《腾讯医典》中参苓白术颗粒与参苓白术丸成分的区别，其中参苓白术颗粒的成分有人参、茯苓、麸炒白术、山药、炒白扁豆、莲子、麸炒薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等；而参苓白术丸的成分焦山楂、姜半夏、陈皮、炒麦芽、六神曲、茯苓、连翘、炒菜菔子等，虽然其成分有所区别，但是在上基本相似，而参苓白术颗粒的沸点低且易溶于水，因此，本方案拟对参苓白术颗粒的含量测定方法进行设计，旨在为参苓白术颗粒的质量标准的提高提供相关参考依据。 二、设计依据 经查阅“中国知网”相关的期刊文献资料及《中国药典》（2020年版）中的内容得知，目前，可用于参苓白术颗粒含量测定方法主要有紫外-可见分光光度法和高效液色谱法等。在研究中发现，紫外-可见分光光度法专属性较差，制剂中的辅料对其测定的干扰较大，样品处理麻烦，仪器操作较复杂，测量结果不够准确。方案选择参苓白术颗粒中人参皂苷的含量，而人参皂苷又易溶于水，且溶于甲醇，便于提取。而应用高效液色谱法又可以不用将杂质分离，应用便捷且准确率高。 三、设计方案 （一）仪器与试药 1.仪器 （1）美国HP110 高效液色谱仪（厂家：美国Waters Breeze? 2，代理商：北京利诚柏泰科技有限公司，型号：Waters Breeze? 2）； （2）G1313A自动进样器（厂家：上海优锦电子有限公司，型号：G1313A）； （3）Hangpinc-FA2004N型电子天平（厂家：步青科技有限公司）。 2.试剂试药 （1）供试品：参苓白术颗粒（厂家：北京同仁，型号：国药准字每袋6g*9袋，批号：030912、030915、030917）； （2）对照品：人参皂苷Re、Rg1（厂家：上海麦克林，批号； （3）99%甲醇（厂家：里斯（天津）医药化学技术有限公司，批号：2012071201）； （4）蒸馏水（自制）。 由于人参皂苷属于混合溶液，其中包含Re、Rg1，为净化其溶液试验，对于样品利用正丁纯粹取溶液进行高效液色谱分析，再采用大孔树胶柱进行净化，净化后收取每30mL注入色谱仪检查，结果去除杂质后，再利用70%乙醇分别制成Re、Rg1洗脱完成。 （二）色谱检测条件 1.流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液20:80 2.检测波长：203nm 3.柱温：30℃ 4.色谱柱：色谱柱（YMC-Pack?ODS-A）(4.6mm×200mm，4μm) 5.流速:1.0mL/min （三）溶液的制备 1.对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1、Re对照品适量，分别加入50%甲醇制成每1ml各含0.3mg的混合溶液，待用。 2.供试品溶液的制备 取参苓白术颗粒约14g，精密称重，加入100mL甲醇，加热回流3h，药渣挥去溶剂，连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中，加入甲醇溶液50 ml，加热回流1 h，放冷，滤过，用少量甲醇洗涤药渣及容器3次，合并洗液和滤液，蒸干，残渣加水50 ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次（20 ml,20 ml,10 ml,10 ml），合并正丁醇提取液，正丁醇液置旋转蒸发仪中减压蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，定量转移至容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。 3.空白溶液的制备 按照处方工艺，将空白溶液与人参皂苷Rg1、Re对照品制成空白溶液制剂，照“对照品溶液的制备”项下方法操作，即得。 （四）方法学考察 1.专属性试验 取对照品溶液、供试品溶液和空白溶液各10μl，分别注入液相色谱仪中，照色谱条件测定。如果供试品溶液在与对照品溶液相同保留时间处有色谱峰，空白对照溶液无干扰峰，则说明方法专属性好。 2.精密度试验 精密吸取同一对照品溶液，连续进样10次，按上述色谱条件测定峰面积，记录色谱图，计算平均值和RSD值。根据RSD值的结果，确定仪器的精密度是否良好。 3.线性关系 精密吸取“对照品溶液的制备”项下的混合对照品溶液1.0、3.0、5.0、10.0、20.0 ml分别置10 ml量瓶中,各加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。以进样量10μL注入液相色谱仪,测定峰面积，以进