氢溴酸右美沙芬原料药有关物质的测定方案.pdfVIP

氢溴酸右美沙芬原料药有关物质的测定方案 一、设计背景 氢溴酸右美沙芬是一种止咳药物，临床上主要用于呼吸道感染疾病，比如咽炎、扁桃 体炎、气管炎、支气管肺炎导致的咳嗽、喘息等症状。 本设计主要通过使用高效液相色谱仪对信立泰药业股份有限公司小试氢溴酸右美沙 芬有关物质的检测，观察药物在中试或小试中出现的杂质以及不必要的峰做监控，监控的 结果影响着该类药物的研发以及杂质处理，做出的药物是否符合药典的要求。 二、设计依据 本方案依据2020版 《中国药典》二部高效液相色谱法的方法而设计。高效液相色谱 法 （High Performance Liquid Chromatography\HPLC）又称 “高效液相色谱”、 “高速 液相色谱、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重 要的分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例 的混合溶剂、缓冲液等流动相泵放入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入 检测器进行检测，从而实现对样品的分析。该方法已经成为化学、医学、工业、农学、商 检和法检等科学领域中重要的分析分离技术。是在经典色谱法的基础上，引用了高效液相 色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9107Pa)；色谱柱是 以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数 可达几万或几十万)；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。 高效液相色谱仪优点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为 了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。②高效：分离效能高。可选择固定相和流动相 以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。③高灵敏度：紫 外检测器可达0.01mg,进样量在μL数量级。④应用范围广：百分之七十以上的有机化合 物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分 析，显示出优势。⑤分析速度快、载液流速快：较经典液体色谱法速度快得多，通常分析 一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。 三、设计方案 （一）仪器 高效液相色谱仪：安捷伦1260高效液相色谱仪 色谱柱：十八烷基硅烷键和硅胶柱 （Titank C18，4.6mm×150mm，3μm） （二）试剂和试药 1.供试品溶液：取氢溴酸右美沙芬1ml于100ml的容量瓶中，加入流动相A，使其稀 释并溶解。供试品溶液来自于信立泰公司合成研究部实验员进行的氢溴酸小试反应液以及 中间体，取其一小部分送样置液相室，配置后所得到的溶液即为供试品溶液。 2.定位溶液：精密量取氢溴酸右美沙芬定位溶液约1.5ml置10ml量瓶中，用流动相 稀释置刻度，摇匀。 3.对照品溶液：准确称取氢溴酸右美沙芬对照品15mg，置50ml量瓶中，用流动相A 溶解并稀释至刻度。 4.杂质C储备液：取杂质C 1.5mg于10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释。杂质C来源 于深圳信立泰药业股份有限公司。该杂质用于定位氢溴酸右美沙芬中该杂质的位置，以便 于观察检测的样品中是否有该杂质的存在。 5.系统适用性溶液：称取氢溴酸右美沙芬15mg于10ml量瓶中，再移取0.5ml杂质C 储备液于同一量瓶中，加流动相溶解并稀释。氢溴酸右美沙芬来源于信立泰公司合成研究 部实验员小试所得到的中间体。 6.流动相A：以缓冲液0.02mol/L磺基丁二酸钠二辛酯和硝酸铵，用醋酸调节pH调 节至2.0-乙腈 （45：35）。称取磺基丁二酸钠二辛酯3.11g与硝酸铵0.56g置1L 的量杯 中，分别量取450ml水与300ml乙腈溶解，用冰醋酸约220ml调节pH值至2.0，用水稀 释至1000ml。配制完成后进行抽滤，超声。 7.流动相B：乙腈作为流动相B。 （流动相A：流动相B 的比例为72：28）。配制完 成后进行抽滤，超声。 （三）测定方法 1.色谱条件 设置检测波长：280nm 进样体积：20μl 柱溫：40℃ 流速：1.0ml/min 2.溶液配制 （1）供试品溶液：取氢溴酸右美沙芬1ml于100ml的容量瓶中，加入流动相A，使 其稀释并溶解。供试品溶液来自于信立泰公司合成研究部实验员进行的氢溴酸小试反应液 以及中间体，取其一小部分送样置液相室，配置后所得到的溶