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第二单元现代生物科技
第1讲基因工程
考纲研读备考定位
考大纲求核心修养
1?
简述基因工程的诞生。
2?简述基因工程的原理及技术。
生命观点
构造决定功能:基因的构造与
1?
3.
举例说出基因工程的应用。
功能。
4?简述蛋白质工程。
理性思维一一成立模型:理解基因工程的操
作流程。
2?
5.
活动:DNA的粗提取和判定。
3?科学探究一一解决问题:基因工程的应用和
蛋白质工
6.
活动:利用聚合酶链式反响
(PCR)扩增DNA片段并完
程。学会细胞中的
DNA的提取和判定方法,学习PCR
成电泳判定,或运用软件进行虚构
技术原理和操作。
PCR实验。
考点一基因工程的操作工具
兰础鱼住
1.基因工程的观点理解
供体:提供目的基因。⑵操作环境:体外。⑶操作水平:分子水平。
原理:基因重组。⑸受体:表达目的基因。
本质:性状在受体体内表达。⑺优点
①与杂交育种相比:战胜了远缘杂交不亲和的障碍。
②与诱变育种相比:定向改造生物遗传性状。
2.DNA重组技术的基本工具
限制性核酸内切酶(简称:限制酶)
①根源:主假如从原核生物中分别纯化出来的。
②作用:辨别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③结果:产生黏性尾端或平尾端。
DNA连结酶
①种类:
常用种类EcoliDNA连结酶T4DNA连结酶
根源大肠杆菌T4噬菌体
功能只缝合黏性尾端缝合黏性尾端和平尾端
结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
②作用:在两个核苷酸之间形成磷酸二酯键以连结两段DNA片段。
⑶载体
①种类:质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
能自我复制
②质粒特点有一个至多个限制酶切割位点
有特殊的标记基因
可至||辨[析
易错整合,判断正误。
(1)
c
EoliDNA连结酶既可连结平尾端,又可
连结黏性尾端
(X)
⑵限制酶也能够辨别和切割
RNA(X)
(3)限制性核酸内切酶、DNA连结酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(X)
(4)载体质粒往常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因(X)
(5)每个质粒DNA分子上起码含一个限制酶辨别位点(V)
延|伸||探|究
F图中的图1和图2分别表示的是EcoRI限制酶和SmaI限制酶的作用示意图,据图
剖析:
请说出EcoRI限制酶和SmaI限制酶识其他碱基序列及切割的位点。
⑵以上实例说明限制酶有何特性?
iA
fil:AITTIAT
G和A之间;SmaI限
[提示](1)EcoR
I限制酶识其他碱基序列是
GAATTC,切割位点在
JUI
制酶识其他碱基序列是CCCGGG,切割位点在G和C之间。
说明限制酶拥有专一性
.基因工程的理论基础
”忸薈摘住丽號甬鈿单位
谢传信息前恃谨拥序祗中心法例
空鞫界共用「董遗传帝码
..........................................................................................-
丽區因在环冠内的雄|
址{語DN[
产亠陋鹿主」風性状)
叫现擀理的毕因
7~
圖tfttl
培[硏
.:丽矗本朗丽血超四种脫氧篩召
皿*井子飆总循碱繭互补配对原则
DNAOT-的空冋构造郁甩规划的双螺輸构造
”....................................................................................—
.基因工程的工具酶
几种酶的比较
DNA连结
比较项目
限制酶
DNA聚合酶
解旋酶
酶
DNA分子
作用底物
DNA分子
脱氧核苷酸
DNA分子
片段
碱基对间的
作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键
氢键
产生黏性尾端
形成重组
形成新的DNA
形成单链
作用结果
或平尾端
DNA分子
分子
DNA分子
⑵限制酶与DNA连结酶的关系
AAT丁C
聽制禰
________________%
DNA(水
解)酶
DNA分子
磷酸二酯
键
形成游离的
脱氧核苷酸
J
CTTAAlI
DNA
IIl
TTAAC
II丨II
对于工具酶的五个注意点
(1)限制酶切割位点所处的地点必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的
完整性,有利于对目的基因的检测。
⑵为使目的基因与载体形成相同的DNA片段尾端连结,往常使用同一种限制酶将二者切
割,但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的尾端也存在互补关系时,则两尾端也可连结
(3)限制酶不切割自己DNA的原因是原核生物中不存在该酶的辨别序列或辨别序列已经被修饰。
限制酶是一类酶,而不是一种酶
(5)DNA连结酶起作用时,不需要模板。
3.载体
载体种类:质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒,最常用的载体是质粒。
作用
①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞
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