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金黄色葡萄球菌检验 金黄色葡萄球菌菌落形态特征 培养基 菌 落 形 态 甘露醇氯化钠琼脂 金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有黄色环，菌落直径0.7~1mm 卵黄氯化钠琼脂 金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有卵磷脂分解的乳浊圈，菌落直径1~2mm * 学习交流PPT 金黄色葡萄球菌检验 血浆凝固酶试验 取灭菌小试管3支，各加入血浆和 无菌水混合液（1：1）0.5ml，再分别加入可疑菌株的营养肉汤培养物（或由营养琼脂培养基斜面培养物制备的浓菌悬液）0.5ml、金黄色葡萄球菌营养肉汤培养物（或由营养琼脂培养基斜面培养物制备的浓菌悬液）0.5ml、营养肉汤或0.9%无菌氯化钠溶液0.5ml，即为试验管、阳性对照管和阴性对照管。将3管同时培养，3小时后开始观察直至24小时。阴性对照管的血浆应流动自如，阳性 对照管血浆应凝固，若试验管血浆凝固者为血浆凝固酶试验阳性，否则为阴性。如阳性对照管或阴性对照管不符合规定时，应另制备血浆，重新试验。 * 学习交流PPT 金黄色葡萄球菌检验 若上述疑似菌为非革兰阳性球菌、血浆凝固酶试验阴性，判供试品未检出金黄色葡萄球菌。 * 学习交流PPT 梭菌检验 取供试液10ml （相当于供试品1g，1ml）2份，其中1份置80℃保温10分钟后迅速冷却。上述2份供试液直接或处理后分别接种至100ml的0.1%新鲜庖肉培养基中。各培养基管在厌氧条件下培养48小时。再取上述培养物0.2ml，涂抹接种于含庆大霉素的哥伦比亚琼脂培养基平板上，在厌氧条件下培养48~72小时。若平板上无菌落生长，判供试品未检出梭菌；若平板上有菌落生长，应挑选2~3个菌落分别进行革兰染色和过氧化氢酶试验。 过氧化氢酶试验 取上述平板上的菌落，置洁净玻片上，滴加3%过氧化氢试液，若菌落表面有气泡产生，为过氧化氢酶试验阳性，否则为阴性。 若上述可疑菌落为革兰阳性梭菌，有或无卵圆形或球形的芽孢，过氧化氢酶阴性，判供试品检出梭菌，否则判供试品未检出梭菌。 * 学习交流PPT 白色念珠菌检验 取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2），直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖液体培养基中，培养48～72小时，取上述培养物，划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，培养24~48小时。 菌落特征：乳白色，偶见淡黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变深，质地变硬或有皱褶。 若平板上无菌落生长或生长的菌落不同于上述特征，判供试品未检出白色念珠菌。 若平板上生长的菌落与上述特征相符或疑似，应挑选2~3个菌落，分别接种念珠菌显色培养基平板上，培养24~48小时。若平板上无绿色或翠绿色的菌落生长，判供试品未检出白色念珠菌。 若有绿色或翠绿色的菌落生长，则挑取相符或疑似菌落接种于1%聚山黎脂80-玉米琼脂培养基培养24~48小时，进行染色镜检及芽管试验。 若上述疑似菌为非革兰阳性菌，显微镜下未见厚膜孢子、假菌丝、芽管，判供试品未检出白色念珠菌。 * 学习交流PPT 结果判断 供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。 供试品的细菌数、霉菌和酵母菌数其中任何一项不符合该品种项下的规定，应从同一批样品中随机抽样，独立复试两次，以3次结果的平均值报告菌数。 眼用制剂检出霉菌和酵母菌数时，须以两次复试结果均不得长菌，方可判供试品的霉菌和酵母菌数符合该品种项下的规定。 若供试品的细菌数、霉菌和酵母菌数及控制菌三项检验结果均符合该品种项下的规定，判供试品符合规定；若其中任何一项不符合该品种项下的规定，判供试品不符合规定。 * 学习交流PPT 谢谢大家！ * 学习交流PPT 知识回顾Knowledge Review * 学习交流PPT 计数培养基适用性检查 结果判定 若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致，判该培养基的适用性检查符合规定。 * 学习交流PPT 样品准备 供试品进入无菌实验室前应作表面消毒，用适宜的消毒液对供试品容器表面进行彻底消毒。 检验数量：应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，膜剂还不得少于4片。 一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。 * 学习交流PPT 样品准备 检验量：除另有规定外，一般供试品的检验量为10 g或10ml；化学膜剂100cm2；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验应增加20g或20ml（其中10g或10ml用于阳性对照试验）。 * 学习交流PPT 供试液制备 液体供试品、固体、半固体或黏稠液供试品 　 取10ml或10g用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至100ml，混匀，作为1：10的供试