生物化学章的生物合成试讲课件.pptVIP

几种主要的修饰方式： 1. 剪接(splicing) 2. 剪切(cleavage) 3. 修饰(modification) 4. 添加(addition) 5. RNA编辑(RNA editing) 第六十二页，共九十页，2022年，8月28日 一、核不均一RNA经首、尾修饰和剪接后成为mRNA 真核生物mRNA转录后，需要进行5?-端和3?-端（首、尾部）的修饰以及对hnRNA进行剪接（splicing），才能成为成熟的mRNA，被转运到核糖体，指导蛋白质翻译。 第六十三页，共九十页，2022年，8月28日 2. DNA双链打开，形成开放转录复合体(open transcription complex) ；DNA分子接近-10区域的部分双螺旋解开后转录开始。 DNA双链解开的范围只在17 bp左右。 1. RNA聚合酶全酶(?2????)识别并结合启动子，形成闭合转录复合体（closed transcription comple）； 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成第一个磷酸二酯键： RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 转录起始过程： 第三十页，共九十页，2022年，8月28日 E.coli的转录起始和延长 第一个进处的核苷酸一般是嘌呤核苷酸，以GTP最常见。 第三十一页，共九十页，2022年，8月28日 第一个磷酸二酯键生成后，转录复合体的构象发生改变， σ亚基即从转录起始复合物上脱落，核心酶连同四磷酸二核苷酸，继续结合于DNA模板上，酶沿DNA链前移，进入延长阶段。 在转录起始复合物形成的过程中，第一个进 处的核苷酸一般是嘌呤核苷酸，以GTP最常见。 第三十二页，共九十页，2022年，8月28日 对?亚基脱落的不同说法-------------北大朱玉贤编《现代分子生物学》第4版教材P76 当RNA聚合酶合成新的RNA链达到9~10核苷酸时，?亚基才被释放，转录起始复合物才通过上游启动子区并生成由核心酶、DNA和新生成的RNA所组成的转录延伸复合物。 新进展 第三十三页，共九十页，2022年，8月28日 二、 RNA pol核心酶独立延长RNA链 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 第三十四页，共九十页，2022年，8月28日 大肠杆菌的转录泡局部结构示意 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA 第三十五页，共九十页，2022年，8月28日 转录延长以下特点 ① 核心酶负责RNA链延长反应； ② RNA链从5?-端向3? -端延长，新的核苷酸都是加到3?-OH上； ③对DNA模板链的阅读方向是3?-端向5?-端，合成的RNA链与之呈反向互补，即酶是沿着模板链的3?向5?方向或沿着编码链的5?向3?方向前进的； ④ 合成区域存在着动态变化的8 bp 的RNA-DNA杂合双链； ⑤ 模板DNA的双螺旋结构随着核心酶的移动发生解链和再复合的动态变化。 第三十六页，共九十页，2022年，8月28日 转录过程中DNA的超螺旋结构变化 转录过程中DNA的超螺旋结构变化 第三十七页，共九十页，2022年，8月28日 三、原核生物转录延长与蛋白质的翻译同时进行 5? 3? DNA 核糖体 RNA RNA聚合酶 在同一DNA模板上，有多个转录同时在进行； 转录尚未完成，翻译已在进行。 第三十八页，共九十页，2022年，8月28日 第三十九页，共九十页，2022年，8月28日 依赖?因子的转录终止 非依赖?因子的转录终止 四、原核生物转录终止分为依赖?因子与非依赖?因子两大类 转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 依据是否需要蛋白质因子的参与，原核生物转录终止分为： 第四十页，共九十页，2022年，8月28日 ?因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质，亚基分子量46kD。 ?因子能结合RNA，又以对poly C的结合力最强，但对poly dC/dG组成的DNA的结合能力就低得多。 ?因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。 （一）依赖?因子的转录终止 ?因子： 第四十一页，共九十页，2022年，8月28日 ?因子的作用原理（热追踪假说）： 课外有趣的思考：1、原核生物中转录和翻译同时进行，链上有核糖体，?因子