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基于ssr标记的福鼎白茶保靖黄金茶1号杂交组合的遗传多样性分析
茶类(l.)o.kete。它是茶科中的植物,也是中国最重要的矿产之一。2018年,我国茶园面积303万hm2,茶叶产量261.6万t,均居世界首位
目前,杂交育种仍是茶树新品种选育的有效手段
1 材料和方法
1.1 试验材料
以福鼎大白茶和安徽1号为母本、保靖黄金茶1号为父本分别采用去雄套袋的方法进行人工杂交,2013年收获F
1.2 方法
1.2.1 dna检测
采用天根生化科技有限公司的植物基因组DNA试剂盒(DP305)提取DNA,提取方法参照试剂盒说明书,检测浓度后稀释到10 ng/μL保存备用。
1.2.2 引用合成
32对SSR引物参照马建强
1.2.3 pcr扩增和产物检测
PCR反应程序参照成杨等
1.2.4 均杂合度指标
利用Popgen Ver.1.32软件计算各SSR标记的有效位点数、平均杂合度期望值、平均杂合度观测值、Shannon信息指数、Nei′s期望杂合度。采用NTSYS2.1软件计算供试材料间的遗传相似系数,按UPGMA(Unweighted pair group method using arith-metic averages)法聚类,并绘制树状聚类图。
2 结果与分析
2.1 F
利用32对SSR引物分别对以保靖黄金茶1号为父本的2个杂交群体和亲本进行荧光PCR扩增,并从中筛选出具有父本特征性条带的引物对F
2.2 引物的两性特征
32对引物共扩增出条带84条,其中多态性条带66条,多态性比例为78.57%。其中,17对引物在双亲中具有多态性,且带型清晰,13对引物具有父本特征性条带;分别在福鼎大白茶×保靖黄金茶1号和安徽1号×保靖黄金茶1号的杂交F
由表3可知,2个杂交F
2.3 混合f
福鼎大白茶×保靖黄金茶1号杂交F
2.4 福鼎白茶保津金茶1号杂交
根据相似系数矩阵按UPGMA进行聚类,结果显示福鼎大白茶×保靖黄金茶1号杂交组合在相似系数为0.60处可划分为3大类:第Ⅰ类群为41株杂交F
3 茶树地方品种的遗传多样性
杂交是品种选育、群体构建、重要基因(QTL)定位等的前提和基础。茶树人工杂交授粉过程中,由于操作不规范导致的未知来源花粉混入易造成后代混杂,且茶树属于异质杂合体,杂交后代遗传基础复杂,性状发生广泛分离,很多性状差异较小,单纯从形态学上很难确定杂种的真实性。SSR标记为共显性标记,能够区分杂合位点和纯合位点,具有重复性好、稳定性强、操作简单、鉴定周期短等特点,已广泛应用于棉花、小麦、花生等多种作物的杂交种鉴定,成为目前用于鉴定真伪杂种的最有效方法之一
杂交群体的遗传变异水平与能否获得优良株系或育种中间材料密切相关。目前关于茶树地方群体遗传多样性研究比较多,但是关于杂种后代的遗传多样性分析比较少。范凯等
茶树由于其高度杂合性,遗传材料较难获得,且生殖周期长,这使得茶树遗传学研究也远远落后于其他经济作物。EST-SSR是染色体上转录区域的共显性标记,在区分高度相似的资源时还需进一步改进,且资源间亲缘关系的分析是基于一定的统计分析基础上的,故标记越多结果越可靠
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