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;循网络 串基础;内容索引;;1.培养基与微生物培养;提醒 (1)LB固体培养基添加琼脂等凝固剂,用于单菌落的分离。
(2)全营养LB培养基与尿素固体培养基:①全营养LB培养基是基础培养基;②尿素固体培养基:选择培养基(如以尿素作为唯一氮源的尿素培养基)和鉴别培养基(如尿素培养基中加入酚红指示剂)。
(3)加入尿素前的固体培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌,尿素溶液用G6玻璃漏斗过滤。;2.微生物分离的两种常用方法的比较;操作工具;提醒 划线分离操作的注意事项
(1)每次划线之前及最后一次划线之后都需要灼烧接种环。
(2)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。
(4)划线时用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。;3.大肠杆菌的培养与分离操作;提醒 (1)使细菌快速分裂增殖:接种在LB液体培养基中。
(2)使细菌生长繁殖形成单个菌落:通过划线分离法或涂布分离法接种在LB固体培养基上。;4.分离以尿素为氮源的微生物;提醒 分离以尿素为氮源的微生物中的易错点
(1)误以为分离以尿素为氮源的微生物时,配制的培养基中加入酚红作为酸碱指示剂,加入琼脂作为凝固剂。正确应为加入琼脂糖作为凝固剂。
(2)误以为降解尿素的反应中反应物只有尿素。降解尿素的反应中反应物除了尿素外还有水。
(3)误以为尿素灭菌采用高压蒸汽灭菌法。尿素遇高温会分解,所以其正确灭菌方法应为用G6玻璃漏斗过滤除菌。;;(3)利用LB液体培养基和LB固体培养基分别对微生物进行分离培养和扩大培养( )
(4)进入无菌室,首先打开超净台上的紫外灯和过滤风,然后在酒精灯的火焰旁制备固体平面培养基( );想一想——漏点知识快补充;3.分离以尿素为氮源的微生物时,配制的培养基中加入琼脂糖作为凝固剂而不是琼脂的原因是什么?;;命题点一 考查细菌的培养和分离
1.请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离的问题:
(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑______、_______和渗透压等条件。
(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行______(填“消毒”或“灭菌”)处理;操作者??双手需要进行清洗和______;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________________。;(3)若用涂布分离法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_________。
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_____________。
(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_____________________________________
_____________________________________。
(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过______(填“消毒”或“灭菌”)处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。;2.下面是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。
实验步骤:
①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面,进行培养。
②待其长出密集的小菌落后,用影印法接种到不含链霉素的培养基2上,随即再影印到含有链霉素的培养基3上,
进行培养。
③在培养基3上出现了个别抗链霉素的菌
落,将其挑选出来。;解析 链霉素是抗生素,对大肠杆菌具有选择作用。在伊红和美蓝培养基上大肠杆菌菌落颜色为黑色。由题图可知,1号培养基接种的方法为涂布分离法。;解析 培养基2和培养基3上相同的菌落,是由具有相同性状的大肠杆菌形成的,将培养基2中一个相应菌落接种到含链霉素的培养基上,若出现较多的菌落,则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之前。;解析 抗链霉素性状是大肠杆菌基因突变后获得的性状。3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多,这说明了基因突变具有稀有性的特点。;命题点二 考查分离以尿素为氮源的微生物
3.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:
(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生_______。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是______
____________________________________________,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_____________________
_______________________________(答出两点即可)。;解析 土壤中的某些细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能产生脲酶。分解尿素的细
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