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基于网络药理学的椭圆叶花锚网络药理学的研究 网络药理学是一门新兴的药理学分支学科。根据系统生物学和网络生物学的基本理论，通过使用相关数据库和算法进行深入挖掘、分析和总结，建立药物治疗对象和机制网络。由于它具有完整性和系统性，因此它特别适用于研究中藏药等药物的联合作用、靶点和作用方式复杂的药物作用机制。 1 仪器、仪器和仪器 Xevo G2-XS QTof液质联用仪（美国Waters公司）；ACQUITY UPLC HSS T3（100×2.1 mm 1.8 μm）色谱柱（美国Waters公司）；Secura513-1CN精密天平（德国赛利多斯）；KQ3200DE型数控超声波清洗器（昆山舒美超声仪器有限公司）；N1200BV-W小型浓缩系统（日本东京理化器械株式会社）；Eyela CA-1115B冷却水循环装置（日本东京理化器械株式会社）；Eyela FDU-2110冷冻干燥机（日本东京理化器械株式会社）；Milli-Q超纯水仪（美国密理博），5810R台式高速冷冻离心机（德国艾本德）。 甲醇、乙腈、甲酸为质谱级（美国Fisher公司）；氢氧化钠（ACS级）（美国Sigma公司）；亮氨酸脑啡肽（StandardsKit for TOF G2-S）（美国Waters公司）；蒸馏水（广州屈臣氏食品饮料有限公司）；超纯水（Milli-Q超纯水仪制备）；其它试剂均为分析纯。 2 方法 2.1 流动相a-1%苯甲酸乙腈溶液 椭圆叶花锚样品采集于青海地区，由青海师范大学曾阳教授鉴定为椭圆叶花锚（ 色谱条件：Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm），体积流量0.3 mL/min,进样量1 μL，柱温40 ℃；流动相0.1%甲酸水溶液（A）-0.01%甲酸乙腈溶液（B）；梯度洗脱条件：0~1 min，99%→90%A；1~10 min，90%→74%A；10~14 min，74%→34%A；14~16 min，34%→1%A；16~19 min，1%A；19~20 min，1%→99%A；20~23 min，99%A；。 质谱条件：电喷雾离子源正/负离子模式（ESI 利用UNIFI数据处理系统、Masslynx V4.1软件及文献比对，完成色谱峰对应化合物的定性分析，筛选确定椭圆叶花锚的化学成分。 2.2 chemrafta法提取sdf 通过Pubchem数据库（/）对鉴定的化合物检索查询Canonical SMILES号，未检索到的化合物利用ChemDraw将化合物结构式保存为SDF格式，将SDF格式文件导入OpenBabel获得Canonical SMILES号；将获得的Canonical SMILES号上传Swiss Target Prediction数据库（http://swisstargetprediction.ch/），点击Predict targets进行预测分析，输出化合物靶点信息 2.3 蛋白-蛋白相互作用 将“2.2”获取的潜在靶点导入String数据库（/），选择“Multiple protein”，物种选择“Homo Sapiens”，下载蛋白相互作用结果，导入Cytoscape 3.6.0软件，得到蛋白相互作用网络图。 2.4 go功能与kegg富集分析 将筛选出的椭圆叶花锚治疗肝炎的潜在靶点输入DAVID数据库（/）进行基因本体（Gene Ontology，GO）生物学过程分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路富集分析，以 2.5 椭圆叶花锚化学成分-靶点-通路网络构建 利用Cytoscape 3.6.0软件构建椭圆叶花锚化学成分-靶点-通路网络图。其中，节点代表化学成分、靶点和信号通路，边用来连接化学成分、靶点和信号通路。 2.6 主要活性成分化学建模和数据对接 对筛选的椭圆叶花锚主要活性成分及核心靶点进行分子对接验证，并用治疗乙型肝炎药物Entecavir做对照分析。首先通过Chem 3D 19.0对主要活性成分化学结构进行优化，然后用AutoDock 4.2.6确定配体可旋转键等，之后从PDB数据库（/pdb）获得关键靶点的3D结构，运用PyMOL 2.3.4软件对蛋白质进行去水、去配体等操作，使用 AutoDock 4.2.6软件对关键靶点进行加氢和计算电荷等处理，最后利用AutoDock Vina 1.1.2软件进行对接，并用PyMOL 2.3.4软件对结果进行可视化处理。 3 结果 3.1 总离子流图 通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析得到椭圆叶花锚总离子流图，见图1。利用UNIFI数据处理系统、Masslynx V4.1软件及文献比对，完成色谱