甲磺酸胺银杏内酯b冻干粉针的安全性评价.docxVIP

甲磺酸胺银杏内酯b冻干粉针的安全性评价 甲基丙烯酸酯b的主要成分是甲基丙烯酸酯b（甲基丙烯酸酯b），化学名称为10-o-（n，n，2）-银杏叶b。甲磺酸胺银杏内酯B是由银杏内酯B结构修饰而成的抗血小板活化因子的化学药物 1 材料和方法 1.1 规格与规格 甲磺酸胺银杏内酯B冻干粉针由江苏柯菲平医药有限公司提供, 规格为每瓶40 mg;批号为061001。实验时用0.9%氯化钠注射液稀释配成所需的受试药液。 1.2 实验动物及环境 SPF级SD大鼠, 雌鼠150只 (体重210～230g) , 雄鼠75只 (体重255～280g) , 由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供, 合格证号SCXK (沪) 2007- 0003;清洁级ICR小鼠, 雄性, 6周龄, 体重22～26 g, 合格证号SCXK (苏) 2002- 0031, 购自南京医科大学实验动物中心。动物房室温控制在20～26 ℃, 相对湿度为40%～70%。所有孕鼠用全价颗粒饲料喂养, 动物进入动物室后适应环境1周。组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门菌 ( 1.3 1.3.1 妊娠合并心脏病大鼠阴道涂片观察 胎仔发育毒性试验 SD大鼠按雄与雌1∶2合笼, 合笼时间5 d, 对雌鼠的阴道涂片进行显微镜检查, 查见精子者定为妊娠0 d。将孕鼠随机分为溶剂对照组、环磷酰胺 (CP) 阳性对照组以及甲磺酸胺银杏内酯B高、中、低剂量组, 每组20只。各组依次尾静脉注射 (iv) 5 ml·kg 1.3.2 菌株鉴定及测试 试验采用TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535 5株菌, 标准平皿掺入法, 在加S9和不加S9的平行条件下测试。试验浓度依次为每皿5000、2000、500、200、50 μg。 1.3.3 chl染色畸形试验 先测定50%生长抑制浓度 (IC 1.3.4 大鼠骨骼微测试 ICR小鼠50只, 随机分为5组, 每组10只。小鼠静脉注射本品急性毒性LD 1.4 窝平均活胎数 孕鼠的体重、摄食量、黄体数、胎盘重, 胎鼠的身长、尾长、体重, 窝平均活胎数均用 2 结果 2.1 2.1.1 污染物入血等 给药期间对每只大鼠进行观察, 未见流产、脱毛、窒息、厌食、共济失调、发绀、立毛、皮毛粗糙、惊厥、呼吸困难、鼻出血、凸眼、流泪、眼睛分泌物增多、活动过强、活动抑制、旋转、嗜眠、腹泻、粪便和尿液等排出物中带血或其他颜色等中毒症状。与溶剂对照组相比, 高、中、低剂量甲磺酸胺银杏内酯B组孕鼠体重增加无显著差异 ( 2.1.2 甲基丙烯酸酯b对胚胎形成的影响 母体检查结果见表1。CP组的活胎数、吸收胎数、黄体数、子宫总重及胎盘总重低于溶剂对照组, 有统计学差异 ( 2.1.3 甲基丙烯酸酯b对胎鼠生长发育的影响 除甲磺酸胺银杏内酯B 50 mg·kg 2.1.4 甲磺酸胺银杏内酯b对甲磺酸胺银杏内酯b低剂量的影响 采用胎鼠徒手切片法进行内脏检查, 结果:除CP组出现腭裂1例、无眼1例、肾积水3例外, 溶剂对照组和甲磺酸胺银杏内酯B高剂量组中未见内脏畸形, 因此甲磺酸胺银杏内酯B中、低剂量组未作检查。甲磺酸胺银杏内酯B高剂量组的胸骨畸形 (5例子代胸骨骨化不全, 18例第5胸骨节缺失) 与溶剂对照组相比有显著差异 ( 2.2 细菌回复突变试验 甲磺酸胺银杏内酯B各剂量组平板背景菌苔正常。菌落计数表明, 5个剂量组中TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535 5株菌, 在加和不加S9条件下的回复突变菌落数未见剂量依赖性增加, 各阳性对照组回复突变菌落数明显增加 (表3) 。因此, 甲磺酸胺银杏内酯B对组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌无诱发回变作用。 2.3 触甲磺酸胺银杏lib 不加S9条件下, 细胞接触甲磺酸胺银杏内酯B 24 h, 剂量为800、400和200μg·ml 2.4 小鼠外观及行为活动异常 给药期间及给药结束观察, 甲磺酸胺银杏内酯B各剂量组小鼠、溶剂对照组小鼠和CP组小鼠外观及行为活动均未出现异常。经骨髓涂片微核计数, 甲磺酸胺银杏内酯B各剂量组与对照组比较, 微核率无明显差异, 嗜多染红细胞与幼红细胞比例也未见明显改变 (表4) 。 3 抗炎抗炎药物 银杏内酯B是中药银杏叶提取物的主要活性成分之一, 可以抑制血小板聚集、抗炎、抗休克、保护心脑血管及治疗急性胰腺炎等, 是治疗急慢性脑缺血疾病的有效药物 本研究表明, 甲磺酸胺银杏内酯B冻干粉针对母体一般状况和子代发育均安全的剂量为25 mg·kg