藤降压片对左旋硝基精氨酸致高血压大鼠模型降压效用及机制研究.docxVIP

藤降压片对左旋硝基精氨酸致高血压大鼠模型降压效用及机制研究 目前，具有明确药理效果和医学证据的抗高血压药物主要是多国产生物科学剂群的化学药物，其中大部分不具备自主知识产权。抗高血压药物的开发相对落后。目前，抗高血压药物，如黄菊抗高血压药、复方钩藤抗高血压药、清痛抗高血压药，其收入较低，疗效、工艺、口感、个人剂量等也存在明显不足。因此，抗高血压药物的开发仍是一个重要的课题。中药有效组分制剂藤菔降压片是以国家高血压中医临床研究基地钩藤莱菔子验方和医疗机构内制剂藤菔降压片 (鲁药制字 为依据, 遵循中药组分配伍的研究思路, 获取该复方抗高血压的主要有效组分并应用药理模型研究其配伍比例而研制的中药新药。本研究选择左旋硝基精氨酸 (L-nitro-ariginine, L-NNA) 诱导的高血压大鼠模型为研究对象, 以藤菔降压片为干预手段, 观察该制剂的抗高血压效应以及对血清内皮素 (Endothelin, ET-1) 、一氧化氮 (Nitric oxide, NO) 、肾素 (Renin) 、血管紧张素Ⅱ (angiotensinⅡ, AngⅡ) 和醛固酮 (aldosterone, ALD) 水平的影响, 从而探索其可能的作用机制, 以期为临床试验提供依据。 1 实验材料 1.1 体质量、材料 SPF级雄性Wistar大鼠68只, 体质量165~212 g, 购自山东鲁抗医药股份有限公司, 合格证书:SCXL (鲁) 1.2 实验药物 1.2.1 钩藤总核苷酸/莱子水溶液衍生物 藤菔降压片由山东中医药大学药学院周洪雷教授提供, 规格为360 mg/片, 每片含钩藤总生物碱18 mg和莱菔子水溶性生物碱21.6 mg。使用前生理盐水溶解, 分别按照3∶2∶1的比例配制质量浓度为75、50、25 mg/m L混悬液, 置4℃冰箱保存备用。 1.2.2 %氯化钠溶液 北京诺华制药有限公司产品, 批号x1041;0.9%氯化钠溶液:山东威高药业有限公司产品, 批号2110813021。使用前生理盐水溶解含缬沙坦1.44 mg/m L的混悬液, 置4℃冰箱保存备用。 1.2.3 l-硝基精氨酸l-na Sigma-Aldrich产品, 生理盐水溶解, 质量浓度3.05 mg/m L, 过滤, 除菌, 置4℃冰箱保存备用。 1.3 免疫检测试剂 内皮素 (ET-1) 酶联免疫检测试剂盒、一氧化氮 (NO) 酶联免疫检测试剂盒、肾素酶联免疫检测试剂盒、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ) 酶联免疫检测试剂盒、醛固酮 (ALD) 酶联免疫检测试剂盒, 以上产品均为美国RDSVSTEMS公司产品。 1.4 无创血压检测仪器 ALC—NIBP型清醒大鼠血压心率测定仪, 上海奥尔科特生物科技有限公司产品;ALC—HTP动物恒温系统 (上海奥尔科特生物科技有限公司) ;ALC—NIBP无创血压测量分析系统 (上海奥尔科特生物科技有限公司) ;ELX808型酶标仪 (美国BIO—TEKISTRUMENTS公司) ;ME235P电子分析天平 (德国赛多利斯公司) ;DT5—3型低速自动平衡离心机 (北京时代北利离心机有限公司) 。 2 实验方法 2.1 l-硝基精氨酸l-na 诱导的高血压大鼠根据文献记载 2.2 大鼠单次注射藤降压片、藤降压片、藤降压片单次注射剂量单次注射单次注射剂量试验 将L-NNA诱发的高血压大鼠均按照体质量随机分为5组, 即模型对照组、阳性对照组、藤菔降压片高剂量组、藤菔降压片中剂量组、藤菔降压片低剂量组, 并选择同批次大鼠腹腔注射等量生理盐水作为正常对照组。 2.3 藤降压片给药剂量 阳性对照组给予缬沙坦混悬液2.88 mg/ (200 g·d) , 藤菔降压片高剂量组给予150 mg/ (200 g·d) , 藤菔降压片中剂量组给予100mg/ (200 g·d) , 藤菔降压片低剂量组给予50mg/ (200 g·d) , 正常对照组和模型组给予等量的生理盐水, 给药途径为灌胃, 每周给药6 d, 连续给药4周。每周测量体质量1次, 并根据体质量的变化调整给药量。 2.4 测试指标 2.4.1 单次给药后，对各组大鼠进行了尾动脉血压和心率的检测 采用无创性尾动脉脉搏间接测压法。 2.4.2 在连续4周后，对各组大鼠进行了尾动脉血压和心率测试 采用无创性尾动脉脉搏间接测压法。 2.4.3 连续4周后，各组大鼠血清内皮素 2.4.4 统计处理方法 计量资料用均数加减标准差 (ue0af±s) 表示, 数据采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析。 3 结果 3.1 单次给药后24小时的血压和心率的比较 3.1.1 单次给药后24小时收缩压变化的比较 3.1.2 沙坦对沙坦血压的影响 与治疗前比较,