与沙棘共生的克尔氏菌的固氮效率及潜力.docxVIP

与沙棘共生的克尔氏菌的固氮效率及潜力 法兰克福斯皮茨是一种非豆类植物的共生结瘤，可以与豆类植物一起形成。 沙棘(Hippophae spp.)为胡颓子科(Elaeagnaceae)灌木或亚乔木，其根系发达，可适应贫瘠干旱及高寒环境，具有重要的生态价值 1 沙棘植物种类的多样性、分布特征和肿瘤 1.1 植物沙棘属植物的分布特点 沙棘属植物包括7种11亚种，其地理分布为南起喜马拉雅山南坡的尼泊尔和锡金，北至波罗的海沿岸的芬兰，东抵俄罗斯贝加尔湖以东地区，西到地中海沿岸的西班牙 我国境内分布的沙棘属植物主要有中国沙棘、西藏沙棘、肋果沙棘、棱果沙棘、云南沙棘、卧龙沙棘、柳叶沙棘、密毛肋果沙棘、理塘沙棘和江孜沙棘等，主要分布于横断山区至青藏高原及其边缘地区。以我们课题组主要研究的中国沙棘、西藏沙棘、棱果沙棘和肋果沙棘为例来说，4种沙棘的分布各有特点。中国沙棘从我国西南到东北，在海拔400–3 100 m之间均有分布，甚至在海拔3 700 m的地区也有分布，而且不同区域分布的中国沙棘既有栽培种也有野生种 1.2 沙棘主根的分布 非豆科植物与弗兰克氏菌共生形成的根瘤在形态结构和发育特点方面均与豆科植物和根瘤菌形成的根瘤不同。非豆科植物根瘤是在弗兰克氏菌的刺激作用下形成的珊瑚状瘤簇，呈不规则球形或大致球形 我们研究发现，中国沙棘主根一般无着生根瘤；西藏沙棘主根和侧根上均可着生根瘤，但主根上着生的根瘤较大；棱果沙棘1级侧根形成的根瘤最多且瘤块较大；肋果沙棘的根瘤主要着生于2-3级侧根 2 沙棘植物根瘤的形态结构和功能 2.1 沙棘属植物根瘤的组织形态 由弗兰克氏菌侵染非豆科植物所形成的根瘤，在形态学上不同于豆科植物的根瘤。豆科植物的根瘤大致分为定型根瘤和不定型根瘤两种，前者的原基起始于外皮层细胞，后者则起始于内皮层细胞 沙棘属植物根瘤是以瘤瓣为基本单位，由粗短珊瑚状瘤瓣组成瘤块 我们研究还发现，同一采样时间采集的不同种沙棘根瘤还具有不同的颜色，中国沙棘随着生长期的逐渐增加，根瘤颜色从淡黄或乳白色，逐渐变为土黄色，甚至呈棕褐色 2.2 其他沙棘根瘤的解剖形态观察 对沙棘根瘤的解剖学研究多采用切片法。晋坤贞等 目前对沙棘根瘤解剖形态的研究只局限于中国沙棘，还应深入开展其他沙棘根瘤的解剖形态观察。由于沙棘根瘤共生弗兰克氏菌难于实现纯培养，采用切片观察时，不仅可以观察到根瘤内弗兰克氏菌的定殖情况，明确弗兰克氏菌在沙棘根瘤中的形态，还能深入探究根瘤结构和发育特点同弗兰克氏菌之间的关系。 2.3 沙棘属植物根瘤的生物生态学特性 微生物-植物共生固氮体系在生态系统中具有重要的生态功能，不论是豆科植物-根瘤菌还是非豆科植物-弗兰克氏菌共生体系，都可以通过生物固氮提高土壤肥力，增强植物的生态适应性，促进生态系统的植被恢复 沙棘属植物根瘤中的弗兰克氏菌通过生物固氮作用将大气中的N 3 沙棘植物的多样性和分布特征 3.1 弗兰克氏菌的多样性 自1978年Callaham等 对于沙棘属植物弗兰克氏菌，早在1982年Burggraaf等 以上研究均表明，沙棘属植物弗兰克氏菌具有丰富的多样性。但由于弗兰克氏菌纯培养时生长缓慢且易受杂菌污染，目前对沙棘属植物弗兰克氏菌分离到的菌株数量还很有限；然而现代分子生物学技术实现了弗兰克氏菌的免培养，对其多样性的研究更加方便，但这些方法都不能获得弗兰克氏菌的纯培养，使得弗兰克氏菌的分类研究停留在有限的菌株范围内，因此难以证明其定种的广泛性和可能性 3.2 沙棘植物生态学的分布特征 弗兰克氏菌在自然界有2个重要的生态位，分别是土壤和寄主植物的根瘤 对于沙棘属植物根瘤中弗兰克氏菌的研究已有大量报道 4 沙棘是植物肿瘤的机制 4.1 沙棘根毛弗兰克氏菌/根毛弗兰克氏菌的及其可能入侵根 土壤被誉为微生物的“天然培养基”，土壤中生活着种类繁多的微生物，包括弗兰克氏菌 弗兰克氏菌从沙棘的根毛进行侵染时，由于根毛初生壁的外层覆盖着一层黏液层，当弗兰克氏菌菌丝遇到黏液层时，黏液层包裹在菌丝表面，使弗兰克氏菌释放纤维素酶等水解酶类，初生壁的微纤维结构被软化，加之弗兰克氏菌的侵入使沙棘内源性水解酶被激活，二者相互作用共同促进初生壁的分解，使得弗兰克氏菌的菌丝侵入根毛 弗兰克氏菌侵染沙棘根部的另一条途径，是从沙棘根皮层薄壁细胞间侵入。弗兰克氏菌丝体在根表皮上生长时，接受到某些特定信号后，菌丝体开始侵入表皮细胞之间的胞间层 4.2 中柱形态变异细胞 放线菌结瘤植物被弗兰克氏菌侵染后形成根瘤 结瘤素通过刺激被侵染的皮层寄主细胞转变成传递细胞，进而转运至中柱鞘细胞，由于中柱鞘细胞的分生活动而诱导形成根瘤原基；根瘤原基细胞继续进行分裂和分化，在被侵染根毛区部位形成前根瘤；前根瘤进一步生长，形成了突出表皮层外的初生根瘤，初生瘤瓣继续生长成熟后，随着瘤瓣内酚类化合物