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真武汤对扩张型心肌病大鼠的干预作用及机制研究 扩张性心肌病（cdm）是一种以心腔扩大和心力衰竭为主要表现为心肌病的心肌病。 1 材料和方法 1.1 质量标准、实验动物 健康16周龄雄性SD大鼠45只, 购于北京维通利华公司, 质量合格证号:SCXK (京) 2012-0001, 体质量180~220 g, 实验动物合格证号:SCXK (苏) 2012-0004。 1.2 试验剂量、试剂盒 注射用盐酸多柔比星 (阿霉素, 10 mg/瓶, 深圳万乐药业有限公司) ;培哚普利片 (雅施达, 4 mg/片, 30片/盒, 国药准字号: 施维雅 (天津) 制药有限公司) ;ELISA试剂盒 (上海蓝基生物科技有限公司) ;Trizol RNA Isolation (美国Invitrogen公司) ;逆转录试剂盒[宝生物工程 (大连) 有限公司];SYBR 1.3 超声诊断仪和elx-400酶联免疫法 BM450A全自动组织包埋机 (常州派斯杰医疗) ;飞利浦CX50超声诊断仪配备12 MHz超声探头 (美国PHILIPS公司) ;Elx-800酶联免疫分析仪 (美国BioTek公司) ;LightCycler480基因扩增仪 (美国BioER公司) 。 1.4 模型和组 45只SD大鼠随机分为正常组 (10只) 和DCM组 (35只) , DCM组大鼠予腹腔注射阿霉素构建DCM模型 1.5 给药实验 培哚普利组:以培哚普利3 mg/ (kg·d) 1.6 观察指标 1.6.1 麻醉成功后卧位固定指标 给药结束后行超声检查, 腹腔注射10%水合氯醛 (3 mL/kg) 进行麻醉, 麻醉成功后仰卧位固定, 测量大鼠左心室舒张末期内径 (LVEDD) 、左心室收缩末期内径 (LVESD) 、左心室射血分数 (LVEF) 和短轴缩短率 (FS) 等数据。 1.6.2 mrna测定 造模前经眶静脉采血, 造模后经下腔静脉取血, 取血后处死, 摘除心脏, 获取左心室心肌, -80℃保存, 用于mRNA测定;取一块多聚甲醛固定, 用于HE染色, 其余心室肌组织用于检测PKC的表达。 1.6.3 血液中的bpr和血管紧张素ang的检测 大鼠血浆BNP及AngⅡ检测将采用酶联免疫吸附法严格按照说明书进行。 1.6.4 血管紧张素1型受体mrna表达量检测 心肌组织于4℃复温, 加入1 mL预冷的50 mmol/L磷酸盐缓冲液 (pH=7.4) 研碎, 裂解细胞膜, 5000 r/min离心15 min后取上清, 采用ELISA法按照说明书测定含量。1.6.5大鼠左室心肌组织匀浆制备与血管紧张素Ⅱ1型受体 (AT1) mRNA表达按照说明书提取左心室心肌组织总RNA。参考文献 1.7 量资料ue0afs 采用SPSS 21.0软件, 计量资料以 (ue0af±s) 表示, 多组间比较采用单因素方差分析。以P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 超声检查超声 造模结束时, 大鼠死亡2只, 剩余33只, 随机抽取5只行心脏超声检查。DCM组大鼠心腔扩大, LVEDD、LVESD均高于正常组 (P0.05) , 而心功能下降, LVEF、FS均低于正常组 (P0.05) , 提示造模成功。 (见表2) 2.2 死亡率 将剩余33只大鼠随机分为真武汤组10只, 培垛普利组10只, 模型组13只。至实验结束时, 模型组死亡2只, 其余各组无死亡。 2.3 两组lvef、fs比较 真武汤组、培哚普利组大鼠LVEDD、LVESD均低于模型组 (P0.01) , 而LVEF、FS均高于模型组 (P0.01) ;真武汤组和培哚普利组两组之间比较, 差异无统计学意义 (P0.05) 。 (见表3) 2.4 各组大鼠血清中真武汤、培对总体文献值的比较表1 真武汤组、培哚普利组大鼠血清BNP明显低于模型组 (P0.01) ;真武汤组和培哚普利组比较, 差异无统计学意义 (P0.05) 。 (见表4) 2.5 各组心肌细胞的状态 正常组大鼠心肌纤维排列整齐, 心肌细胞未见变性坏死。模型组大鼠心肌纤维排列紊乱, 肌纤维断裂, 细胞间隙增宽、水肿, 心肌细胞肥大并有空泡变性, 间质纤维化。真武汤组与培哚普利组心肌细胞肥大、空泡变性, 间质轻度纤维化程度低于模型组。 (见图1) 2.6 各组大鼠血清中真武汤、培对总体文献值的比较表1 真武汤组、培哚普利组大鼠血浆AngⅡ明显低于模型组 (P0.01) ;真武汤组和培哚普利组比较, 差异无统计学意义 (P0.05) 。 (见表5) 2.7 各组小鼠体内na表达水平比较 真武汤组、培哚普利组大鼠血浆AT1 mRNA表达明显低于模型组 (P0.01) ;真武汤组和培哚普利组比较, 差异无统计学意义