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黄香楝树活性成分的提取及防晒研究
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朱俐俐,李易珍,王玉变,代东,冯海,2*
(1.浙江工业大学药学院,浙江杭州310032;2.普陀晨帆海洋科技有限公司,浙江舟山316100)
精细化工
黄香楝树活性成分的提取及防晒研究
朱俐俐1,李易珍1,王玉变1,代东1,冯海1,2*
(1.浙江工业大学药学院,浙江杭州310032;2.普陀晨帆海洋科技有限公司,浙江舟山316100)
目的:研究黄香楝树活性成分的提取优化并考察其防晒作用。方法:采用溶剂提取法,对影响提取的料液比、提取时间、温度、溶剂浓度(V%)四个因素进行正交优化,制成防晒用品并与市售产品进行对比研究。结果:最佳提取条件为料液比1:5,提取时间90 min,温度50℃,乙醇浓度85%,33.3μg/mL的提取物在UVB段平均吸光度达到0.896,且防护效果优于市售防晒霜。结论:按上述条件提取的防晒活性成分在UVB段有较强紫外吸收能力,可开发成天然植物防晒用品。
黄香楝树;UVB;防晒
随着大气中臭氧层的破坏日益严重,紫外线对人体造成的损伤逐渐引起重视。紫外线可分为UVA、UVB、UVC[1],其中UVB(280~320 nm)照射会导致皮肤出现红斑、色素沉着以及DNA损伤等一系列问题。目前常用的防晒成分分为化学和物理防晒剂,化学防晒剂虽具有较好的紫外吸收效果,但对皮肤有一定刺激性,而不含化学合成物的天然防晒剂则可用于孕妇、婴儿等敏感人群。
黄香楝树(Hesperethusa crenulata),属芸香科,是生长于印度次大陆和东南亚地区的热带植物。在缅甸,人们将其磨成的粉末称为特纳卡(Thanakha)并涂抹于脸上,用于防晒、清凉、美容,但存在使用不便及影响美观等问题,提取其有效成分可用于化妆品制备[2]。本文采用溶剂提取法,以UVB段紫外吸收为评价指标[3],采用正交优化筛选出最佳提取条件,并以小鼠为模型动物,观察其防晒效果。
1 实验部分
1.1 实验材料
黄香楝树(缅甸)、ICR小鼠[浙江省医学科学院,许可证:SCXL[(浙)2014-0001]、UVB紫外灯(8 w×4,上海季光特种照明电器厂)、Spectramax M2e型多功能酶标仪(Molecular Devisces)、二氯甲烷(上海凌峰华兴试剂有限公司,分析纯)、丙酮(杭州双林化工试剂厂,分析纯)、市售防晒霜(watson,SPF=30)。
1.2 实验方法
1.2.1 提取溶剂选择
相关研究表明,黄香楝树防晒活性成分存在一定极性,因此分别用95%乙醇、二氯甲烷、丙酮、水进行提取。将黄香楝树树皮粉碎,过50目筛,分别用上述四种溶剂加热回流提取2 h,料液比为1:10得到提取物,稀释150倍后测定其在200~400 nm处的吸光度。
1.2.2 提取单因素考察
实验方法
取黄香楝树粉末10.00 g,采用乙醇溶剂加热回流提取,旋蒸得到产物,精密称取0.0200 g产物,溶于4 mL乙醇,稀释150倍后测定其在280 nm、290 nm、300 nm、310 nm、320 nm处吸光度A,取其平均值为UVB段吸光度[4]。
单因素考察
根据方法,对不同提取时间(30 min、60 min、90 min、120 min、150 min、180 min)、不同温度(30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃)、不同乙醇浓度(55%、65%、75%、85%、95%)、不同料液比(1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶30)四个单因素进行考察。
1.2.3 正交试验优化
根据1.2.2得出主要影响因素为料液比(A)、提取温度(B)、乙醇浓度(C)、时间(D)四个因素,以四因素三水平建立如表1所示因素水平表,进行L9(34)正交设计。
表1 优化提取条件的因素水平表
1.2.4 提取物处方设计
对提取活性成分进行制剂研究,设计处方:油相:液体石蜡2.5 g,硬脂酸甘油酯2.5 g,凡士林0.5 g,软磷脂0.5 g,提取物溶液(1 g、2 g提取物分别溶于2.5 g 1,2-丙二醇);水相:丙三醇1 g,吐温800.5 g,HA(0.5%10 mL),纯水加至50 mL[5]。
制备方法:将油相加热至80℃,在10000 r/min条件下将油相缓慢加入80℃水相,乳化3 min,室温下自然冷却[6],制成含提取物2%、4%两种不同浓度的制剂备用。
1.2.5 黄香楝树提取物抗小鼠光损伤实验
根据文献建立小鼠光损伤模型,取24只ICR小鼠,雌雄各半,8%Na2S脱去小鼠脊柱两侧毛(皮肤完整,无红斑、无破损)。24 h后随机分成3组,分别为黄香楝树高、低剂量组、市售组。3%水合氯醛麻醉,将皮肤划分为左右两个区域,左侧涂抹空白对照制剂,右侧涂抹1.2.4制成的样品或市售防晒霜,乳剂用量约
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